Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 49 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

оболочки растирают в ступке. Для работы используется 10 %
водная суспензия.
Ход работы.
1. Готовят 2 колбы (или стаканчика) для
опытной и контрольной проб. Для контрольной пробы
липазу предварительно кипятят в течение 10 мин на ки-
пящей бане. В каждую колбу наливают молоко и препарат
липазы, как указано в таблице 1.
Таблица 1
Компоненты
инкубационной смеси
Опыт,
мл
Контроль,
мл
Молоко (разведенное в
соотношении 1:10)
Препарат липазы
(прокипяченный)
10
1
10
1
2. Приготовленные инкубационные смеси тщательно
перемешивают. Затем из каждой колбы отбирают по 2 мл
смеси в заранее приготовленные стаканчики для титрования.
В каждый стаканчик добавляют по 1—2 капли раствора
фенолфталеина и титруют раствором гидроксида натрия до
слабо-розового окрашивания. При первом титровании
нейтрализуются органические кислоты — молочная и другие,
которые присутствовали в молоке до начала действия липазы.
3. Оставшуюся в колбах смесь помещают в термостат,
температура которого 38—40°С, и через определенные
интервалы (15, 30, 90 мин) из каждой пробы отбирают (не
вынимая из термостата) по 2 мл смеси и титруют 0,01 моль/л
раствором гидроксида натрия. Время титрования и объем
израсходованного гидроксида натрия фиксируют в таблице 2.
Таблица 2.
Объем 0,01 моль/л NaOH, пощедшего на
титрование, мл
Время
инкубации,
мин
Опытная проба Контрольная проба
0
15
30
60
90
4. Результат первого титрования, полученного до начала
действия липазы, вычитают из результатов последующих
титрований.
5. На основании полученных данных строят график, где
по оси абсцисс откладывают время (в минутах), а по оси
ординат — активность липазы, выраженную объемом 0,01 
оболочки растирают в ступке. Для работы используется 10 %              3. Оставшуюся в колбах смесь помещают в термостат,
водная суспензия.                                                температура которого 38—40°С, и через определенные
Ход работы. 1. Готовят 2 колбы (или стаканчика) для              интервалы (15, 30, 90 мин) из каждой пробы отбирают (не
опытной и контрольной проб. Для контрольной пробы                вынимая из термостата) по 2 мл смеси и титруют 0,01 моль/л
липазу предварительно кипятят в течение 10 мин на ки-            раствором гидроксида натрия. Время титрования и объем
пящей бане. В каждую колбу наливают молоко и препарат            израсходованного гидроксида натрия фиксируют в таблице 2.
липазы, как указано в таблице 1.                                                                                 Таблица 2.
                                                    Таблица 1        Время        Объем 0,01 моль/л NaOH, пощедшего на
       Компоненты                  Опыт,        Контроль,         инкубации,                  титрование, мл
  инкубационной смеси               мл              мл                мин         Опытная проба        Контрольная проба
 Молоко (разведенное в                                                 0
 соотношении 1:10)                  10              10                 15
 Препарат липазы                     1               1                 30
 (прокипяченный)                                                       60
                                                                       90
  2. Приготовленные инкубационные смеси тщательно
перемешивают. Затем из каждой колбы отбирают по 2 мл
смеси в заранее приготовленные стаканчики для титрования.             4. Результат первого титрования, полученного до начала

В каждый стаканчик добавляют по 1—2 капли раствора               действия липазы, вычитают из результатов последующих

фенолфталеина и титруют раствором гидроксида натрия до           титрований.

слабо-розового      окрашивания.    При    первом   титровании       5. На основании полученных данных строят график, где
нейтрализуются органические кислоты — молочная и другие,         по оси абсцисс откладывают время (в минутах), а по оси
которые присутствовали в молоке до начала действия липазы.       ординат — активность липазы, выраженную объемом 0,01

Страницы