Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 55 стр.

UptoLike

Рубрика: 

жащие для приготовления контроля на содержание фосфора
в реактивах, добавляют 1,0 мл реактива 1 и нагревают в
течение 45 мин на кипящей водяной бане.
Разделение фосфолипидов печени ТСХ
После этого охлаждают до комнатной температуры,
прибавляют 4,8 мл реактива 2, тщательно перемешивают и
вновь нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин.
Затем пробирки быстро охлаждают в холодной воде и
центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин для
осаждения силикателя. Надосадочную жидкость сливают и
фотометрируют на ФЭКе против контроля на реактивы при
красном светофильтре, в кюветах толщиной 1 см.
Величины экстинкций, полученные в контрольных
пробах силикагеля, вычитают из экстинкций,
характеризующих отдельные фосфолипидные фракции.
Сумму экстинкций принимают за 100% и процентное
содержание каждой фракции определяют относительно этой
суммы.
В случае необходимости определения абсолютных
значений содержание фосфора в отдельных фосфолипидных
фракциях находят по калибровочной кривой. Для
построения калибровочной кривой стандартный раствор,
содержащий в 0,1 мл 1 мкг фосфора, помещают в 6 пробирок
(0,1 мл, 0,2 мл, 0,4 мл, 0,6 мл, 0,8 мл и 1,0 мл). Воду досуха
выпаривают и дальнейшую обработку проводят, как
описано выше.
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ И КОНТРОЛЯ
УСВОЕНИЯ ТЕМЫ «ЛИПИДЫ»
1. Напишите по одной формуле триацилглицеринов,
характерные для:
а) твердого животного жира
жащие для приготовления контроля на содержание фосфора      фотометрируют на ФЭКе против контроля на реактивы при
в реактивах, добавляют 1,0 мл реактива №1 и нагревают в     красном светофильтре, в кюветах толщиной 1 см.
течение 45 мин на кипящей водяной бане.                         Величины экстинкций, полученные в контрольных
                                                            пробах     силикагеля,       вычитают     из     экстинкций,
           Разделение фосфолипидов печени ТСХ
                                                            характеризующих отдельные фосфолипидные фракции.
                                                            Сумму экстинкций принимают за 100% и процентное
                                                            содержание каждой фракции определяют относительно этой
                                                            суммы.
                                                                В случае необходимости определения абсолютных
                                                            значений содержание фосфора в отдельных фосфолипидных
                                                            фракциях    находят    по    калибровочной     кривой.    Для
                                                            построения калибровочной кривой стандартный раствор,
                                                            содержащий в 0,1 мл 1 мкг фосфора, помещают в 6 пробирок
                                                            (0,1 мл, 0,2 мл, 0,4 мл, 0,6 мл, 0,8 мл и 1,0 мл). Воду досуха
                                                            выпаривают и дальнейшую обработку проводят, как
                                                            описано выше.


      После этого охлаждают до комнатной температуры,        ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ И КОНТРОЛЯ
прибавляют 4,8 мл реактива №2, тщательно перемешивают и                  УСВОЕНИЯ ТЕМЫ «ЛИПИДЫ»
вновь нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин.
Затем пробирки быстро охлаждают в холодной воде и           1. Напишите по одной формуле             триацилглицеринов,
центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин для         характерные для:
осаждения силикателя. Надосадочную жидкость сливают и       а) твердого животного жира