Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 11 стр.

UptoLike

Рубрика: 

11
Реакция запускается внесением в реакционную смесь 30 мкл
0,06% раствора перекиси водорода.
Контрольная кювета содержит те же реактивы, НО! в нее не вносится
перекись водорода.
Измерение оптической плотности проводят при длине волны 290 нм
ежесекундно в течение 100 с.
Расчёты
Расчет активности аскорбатпероксидазы в относительных единицах на
один грамм сухого веса проводится по формуле:
A = (ΔD•V•X)/(T•L•m•Δm),
где:
А – активность фермента,
ΔD – изменение оптической плотности (вычесть из оптической плотности в
конце реакции оптическую плотность в начальный момент времени),
V – общий объём полученной вытяжки, мл,
X конечное разведение вытяжки в кювете (объём реакционной смеси
разделить на количество вносимого экстракта),
T – время реакции, с,
L – толщина слоя, см,
mмасса навески, г,
Δm – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.).
Для определения активности фермента на мг белка используют
следующую формулу:
A = ((ΔD/T)•X)/(L•С)
где:
А – активность фермента,
ΔD – изменение оптической плотности (вычесть из оптической плотности в
конце реакции оптическую плотность в начальный момент времени),
X конечное разведение вытяжки в кювете (объём реакционной смеси
разделить на количество вносимого экстракта),
       Реакция   запускается    внесением    в   реакционную   смесь   30   мкл
0,06% раствора перекиси водорода.
       Контрольная кювета содержит те же реактивы, НО! в нее не вносится
перекись водорода.
       Измерение оптической плотности проводят при длине волны 290 нм
ежесекундно в течение 100 с.
                                    Расчёты
       Расчет активности аскорбатпероксидазы в относительных единицах на
один грамм сухого веса проводится по формуле:
                               A = (ΔD•V•X)/(T•L•m•Δm),
где:
А – активность фермента,
ΔD – изменение оптической плотности (вычесть из оптической плотности в
        конце реакции оптическую плотность в начальный момент времени),
V – общий объём полученной вытяжки, мл,
X – конечное разведение вытяжки в кювете (объём реакционной смеси
        разделить на количество вносимого экстракта),
T – время реакции, с,
L – толщина слоя, см,
m – масса навески, г,
Δm – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.).
       Для определения активности фермента на мг белка используют
следующую формулу:
                                 A = ((ΔD/T)•X)/(L•С)
где:
А – активность фермента,
ΔD – изменение оптической плотности (вычесть из оптической плотности в
        конце реакции оптическую плотность в начальный момент времени),
X – конечное разведение вытяжки в кювете (объём реакционной смеси
        разделить на количество вносимого экстракта),

                                            11