Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 9 стр.

Δm – отношение сухого веса к сырому (см. гл. 5.1.).
       Для определения активности фермента на мг белка использовали
следующую формулу:
                                 A = ((ΔD/T)•X)/(L•С),
где:
А – активность фермента,
ΔD – изменение оптической плотности (вычесть из оптической плотности в
конце реакции оптическую плотность в начальный момент времени),
X – конечное разведение вытяжки в кювете (объём реакционной смеси
разделить на количество вносимого экстракта),
T – время реакции, с,
L – толщина слоя, см,
С – содержание белка в пробе, мг (см. гл. 5.2.).
       Измерение активности пероксидазы проводят в нескольких (не менее
трёх) биологических и аналитических повторностях. Стандартную ошибку
вычисляют в программе Microsoft Office Excel (опция «Описательная
статистика»).


             1.2. Определение активности аскорбатпероксидазы
       Активность аскорбатпероксидазы (ЕС 1.11.1.7) определяют, как описано
Верма и Дубей (Verma, Dubey, 2003). Метод основан на определении скорости
разложения перекиси водорода аскорбатпероксидазой исследуемого образца с
образованием воды и дегидроаскорбата.
                           Необходимые реактивы:
1) 50 мМ K,Na-фосфатный буфер (рН 7,8).
2) 50 мМ K,Na-фосфатный буфер (рН 7,0).
       Оба буфера готовят из сток-растворов:
0,2 М КН2РО4 (1,36 г КН2РО4 довести до 50 мл дистиллированной водой),
0,2 М NaOH (400 мг NaOH довести до 50 мл дистиллированной водой).
       Приготовление 50 мМ K,Na-фосфатного буфера, рН 7,8:

                                           9