Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 25 стр.

UptoLike

Рубрика: 

25
Ход работы
Приготовление сток-раствора для заливки пробки:
Смешать 3 мл 30% акриламида-бисакриламида, 1,5 мл 1,5 М буфера для
разделяющего геля, 1,5 мл воды. Для заливки пробки при использовании
стекла размером 10×8 см и толщиной 1 мм взять 1 мл сток-раствора.
Непосредственно перед заливкой добавить 25 мкл ПСА и 5 мкл ТЕМЕД
(тетраметилэтилендиамин).
Приготовление сток-раствора для концентрирующего геля (5%):
Смешать 0,63 мл 1,25 М буфера для концентрирующего геля, 0,83 мл 30%
сток-раствора акриламида-бисакриламида и 3,42 мл воды. Для заливки
концентрирующего геля при использовании стекла размером 10×8 см и
толщиной 1 мм взять 2 мл сток-раствора. Непосредственно перед заливкой
добавить 20 мкл ПСА и 3 мкл ТЕМЕД.
Приготовление разделяющего геля:
10% гель
Смешать 5 мл 1,5 М буфера для разделяющего геля, 6,6 мл 30% сток-
раствора акриламида-бисакриламида и 8,1 мл воды. Непосредственно перед
заливкой добавить на 8 мл раствора 80 мкл ПСА и 8 мкл ТЕМЕД.
8% гель
Смешать 3 мл 1,5 М буфера для разделяющего геля, 6 мл 30% сток-
раствора акриламида-бисакриламида и 15 мл воды. Непосредственно перед
заливкой добавить на 8 мл раствора 80 мкл ПСА и 8 мкл ТЕМЕД.
7% гель
Смешать 2 мл 1,5 М буфера для разделяющего геля, 4 мл 30% сток-
раствора акриламида-бисакриламида и 10 мл воды. Непосредственно перед
заливкой добавить на 8 мл раствора 80 мкл ПСА и 8 мкл ТЕМЕД.
Растворы для приготовления гелей без ПСА и ТЕМЕД можно
хранить в холодильнике 2-3 недели.
Заливка геля
Вымыть камеры детергентом, хорошо сполоснуть, высушить;
                              Ход работы
     Приготовление сток-раствора для заливки пробки:
     Смешать 3 мл 30% акриламида-бисакриламида, 1,5 мл 1,5 М буфера для
разделяющего геля, 1,5 мл воды. Для заливки пробки при использовании
стекла размером 10×8 см и толщиной 1 мм взять 1 мл сток-раствора.
Непосредственно перед заливкой добавить 25 мкл ПСА и 5 мкл ТЕМЕД
(тетраметилэтилендиамин).
     Приготовление сток-раствора для концентрирующего геля (5%):
     Смешать 0,63 мл 1,25 М буфера для концентрирующего геля, 0,83 мл 30%
сток-раствора акриламида-бисакриламида и 3,42 мл воды. Для заливки
концентрирующего геля при использовании стекла размером 10×8 см и
толщиной 1 мм взять 2 мл сток-раствора. Непосредственно перед заливкой
добавить 20 мкл ПСА и 3 мкл ТЕМЕД.
     Приготовление разделяющего геля:
     10% гель
     Смешать 5 мл 1,5 М буфера для разделяющего геля, 6,6 мл 30% сток-
раствора акриламида-бисакриламида и 8,1 мл воды. Непосредственно перед
заливкой добавить на 8 мл раствора 80 мкл ПСА и 8 мкл ТЕМЕД.
     8% гель
     Смешать 3 мл 1,5 М буфера для разделяющего геля, 6 мл 30% сток-
раствора акриламида-бисакриламида и 15 мл воды. Непосредственно перед
заливкой добавить на 8 мл раствора 80 мкл ПСА и 8 мкл ТЕМЕД.
     7% гель
     Смешать 2 мл 1,5 М буфера для разделяющего геля, 4 мл 30% сток-
раствора акриламида-бисакриламида и 10 мл воды. Непосредственно перед
заливкой добавить на 8 мл раствора 80 мкл ПСА и 8 мкл ТЕМЕД.
     Растворы для приготовления гелей без ПСА и ТЕМЕД можно
хранить в холодильнике 2-3 недели.
     Заливка геля
    Вымыть камеры детергентом, хорошо сполоснуть, высушить;

                                     25