Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений. Сибгатуллина Г.В - 26 стр.

UptoLike

Рубрика: 

26
Собрать камеру для проведения гельэлектрофореза;
Добавить к нужному количеству раствора для пробки необходимое
количество ПСА и ТЕМЕД;
Немедленно залить пробку;
После окончания полимеризации пробки добавить в раствор для нижнего
(разделяющего) геля ПСА и ТЕМЕД;
Немедленно залить нижний (разделяющий) гель;
Наслоить сверху безводным н-бутанолом (1-2 мм);
После завершения полимеризации отобрать н-бутанол тонкой пипеткой,
2-3 раза хорошо сполоснуть получившийся карман дистиллированной
водой до удаления запаха спирта, удалить остатки воды фильтровальной
бумагой, не касаясь геля;
Вставить (не до конца!!!) гребенку между стеклами (до дна кармана
должно остаться 0,5-1 см);
Добавить в раствор для верхнего онцентрирующего) геля ПСА и
ТЕМЕД;
Залить верхний (концентрирующий) гель;
После полимеризации установить верхнюю камеру в поддон, залить
разбавленный буфер для проведения гельэлектрофореза, вытащить
гребенку;
Немедленно промыть лунки шприцом, поправить изогнувшиеся
перегородки между карманами (можно иглой шприца);
Внести в карманы необходимое количество проб;
Подсоединить камеру к источнику тока.
При разделении в концентрирующем геле задать напряжение 50 вольт, в
разрешающем – 100 вольт.
   Собрать камеру для проведения гельэлектрофореза;
   Добавить к нужному количеству раствора для пробки необходимое
    количество ПСА и ТЕМЕД;
   Немедленно залить пробку;
   После окончания полимеризации пробки добавить в раствор для нижнего
    (разделяющего) геля ПСА и ТЕМЕД;
   Немедленно залить нижний (разделяющий) гель;
   Наслоить сверху безводным н-бутанолом (1-2 мм);
   После завершения полимеризации отобрать н-бутанол тонкой пипеткой,
    2-3 раза хорошо сполоснуть получившийся карман дистиллированной
    водой до удаления запаха спирта, удалить остатки воды фильтровальной
    бумагой, не касаясь геля;
   Вставить (не до конца!!!) гребенку между стеклами (до дна кармана
    должно остаться 0,5-1 см);
   Добавить в раствор для верхнего (концентрирующего) геля ПСА и
    ТЕМЕД;
   Залить верхний (концентрирующий) гель;
   После полимеризации установить верхнюю камеру в поддон, залить
    разбавленный буфер для проведения гельэлектрофореза, вытащить
    гребенку;
   Немедленно    промыть       лунки   шприцом,   поправить   изогнувшиеся
    перегородки между карманами (можно иглой шприца);
   Внести в карманы необходимое количество проб;
   Подсоединить камеру к источнику тока.
   При разделении в концентрирующем геле задать напряжение 50 вольт, в
    разрешающем – 100 вольт.




                                        26