Свойства растворов высокомолекулярных соединений. Симбирских Е.С. - 16 стр.

                              5. ЭЛЕКТРОФОРЕЗ БЕЛКОВ

              Биологические макромолекулы – белки, нуклеиновые ки-
         слоты, полисахариды, являясь полиэлектролитами, находятся в
         растворе в виде заряженных частиц. Под действием электриче-
         ского поля заряженные частицы перемещаются к катоду или ано-
         ду в зависимости от знака их суммарного заряда. Такое явление
         называется электрофорезом.
              На способности биополимеров к электрофорезу основан
         скоростной высокочувствительный метод их исследования. С
         помощью электрофореза можно разделить белковые смеси, а
         также охарактеризовать чистоту белковых препаратов. В послед-
         нее время этот метод широко применяется для препаративного
         выделения ферментов.
              Принцип электрофореза состоит в том, что молекулы белка,
         содержащие кислые и основные ионизированные группы, имеют
         определенный свободный электрический заряд. Поскольку его
         величина у молекул различных белков неодинакова, то скорость
         перемещения их в электрическом поле при рН, не соответствую-
         щем изоэлектрической точке, будет различна. Вследствие этого
         под действием электрического тока смесь белков разделяется на
         несколько отдельных зон, или фракций. Скорость движения час-
         тицы в электрическом поле называют электрофоретической под-
         вижностью (ЭП) и по ее величине идентифицируют белковые
         фракции.
              ЭП зависит не только от суммарного электрического заряда,
         но и от рH, ионной силы среды, а также молярной концентрации
         буферных растворов, которые являются средой для перемещения
         белковых молекул. Существенное влияние на подвижность мо-
         лекул в электрическом поле оказывает и их молекулярная масса.
              В настоящее время наиболее широкое применение нашел
         дискэлектрофорез в полиакриламидном геле, разработанный в
         1959 г. Л. Орнстейном и Б.Дэвисом. При этом применяют пре-
         рывистую разделяющую систему из пары буферов и разных сло-
         ев геля, отличающихся друг от друга по размерам пор. Гелями
         заполняют цилиндрические трубки или покрывают пластинки.
         При разделении белковая смесь сначала концентрируется в узкой
         полосе крупнопористого полиакриламидного геля, а затем в мел-

         16

PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com