Лабораторный практикум по дисциплине Основы токсикологии ОПД.Ф.09. Сперанский В.В - 8 стр.

UptoLike

делительной воронке, добавляя 1-1,5 г. поваренной соли, экстра-
гируют три раза хлороформом по 50 мл, дореформенные вы-
тяжки обезвоживают безводным сернокислым натрием фильтруют
и выпаривают.
Сухой остаток растворяют в 0,2-0,5 мл хлороформа,
наносят на пластинку и хроматографируют.
Край пластинки с нанесенными растворами должен
быть погружен в растворитель бензол не более чем 0,5 см.
После того как фронт растворителя поднимается на 10 см.,
пластинку вынимают из камеры
и
оставляют на несколько
минут для испарения растворителя. Пластинку вновь
помещают в камеру для хроматографирования с
подвижным растворителем (смесь гексана с ацетоном 1:1)
и хроматографируют как указана выше. Высушенную пла-
стинку опрыскивают проявляющим реактивом (1 % раствор
резорцина в 10% растворе КОН и помещают в сушильный
шкаф при Т-100
0
С
до появления оранжево-красных пятен.
КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ НА
МЕТИЛЭТИЛТИОФОС
. Проводится как с хлорофосом, но
при прибавлении молибдата аммония и азотной кислоты
выпадает осадок зеленого цвета, который переходит при
нагревании в желтый цвет.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОТРАВЛЕНИЕ
ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ.
(2 мышки, крысы, кролик, кошки) путем
парэнтериалъного введения хлорофоса из расчета от 500 до
1000 мг/ кг веса животного в зависимости от вида: кролика
- 650 мг/ кг
кошкам - 800 мг/ кг
крысам -1000 мг/кг.
При постановке биологической пробы изучают
токсические свойства хлорофоса, клинические признаки и
антидотную терапию при отравлениях ФОС (атропинасульфат,
фосфалит, ТМБ-4, тропацин, аминазин)
ПОСТАНОВКА БИОПРОБЫ.
Опытной мышке и кролику вводится подкожно раствор хлорофоса в
летальной дозе. Затем за животным ведут наблюдение, определяют
характерные клинические признаки при отравлении ФОС и проводят
антидотную терапию атропином из расчета 3 мг/ г веса животного.
Обратить внимание на лечебную эффективность атропина,
фосфолитиш, тропацина при отравлениях ФОС и отметить их недостаток,
как антидотаого препарата.
Второй мышке также вводится раствор хлорофоса в летальной
дозе, а контрольной - растворитель хлорофоса в этом же объеме, что и
опытной.
После смерти опытной мышки, вскрыть и просмотреть
паталогоанатомические изменения ЦНС и внутренних органов.
Результаты органов записать.
Ферментный метод определения фосфорорганических
пестицидов в патматериале.
Реактивы:
1. Основной индикаторно- буферный раствор (р-р 1)
2. Индикаторно-буферный раствор (р-р 2)
3. Индикаторно-буферный раствор ацетилхолина (р-р ЖЗ)
4. Холиноетераза или сыворотка крови лошади.
ОПИСАНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
: 20 грамм материала
измельчают, заливают равным количеством хлороформа и
экстрагируют 1 час периодически перемешивая. Затем пипеткой
набирают 1 мл хлороформенного экстракта и переносят в
химический стаканчик или пробирку. В контрольный стаканчик
(пробирку) вносят 1 мл хлороформа. Оба стаканчика помещают в
водяную баню на 3 мин. После этого стаканчик охлаждают до
комнатной температуры и вносят в них по 1 мл раствора
холинэстераза или сыворотку крови лошади. Содержимое хорошо
перемешивают и ставят стаканчики в водяную баню (38-39) на 30
мин. Затем в две пробирки берут по 0,5 мл содержимого
стаканчика, прибавляют по 4,5 мл
раствора 3 и отмечают время.
делительной воронке, добавляя 1-1,5 г. поваренной соли, экстра-         ПОСТАНОВКА БИОПРОБЫ.
гируют три раза хлороформом по 50 мл, дореформенные вы-                 Опытной мышке и кролику вводится подкожно раствор хлорофоса в
тяжки обезвоживают безводным сернокислым натрием фильтруют        летальной дозе. Затем за животным ведут наблюдение, определяют
и выпаривают.                                                     характерные клинические признаки при отравлении ФОС и проводят
      Сухой остаток растворяют в 0,2-0,5 мл хлороформа,           антидотную терапию атропином из расчета 3 мг/ г веса животного.
наносят на пластинку и хроматографируют.                                Обратить внимание на лечебную эффективность атропина,
      Край пластинки с нанесенными растворами должен              фосфолитиш, тропацина при отравлениях ФОС и отметить их недостаток,
быть погружен в растворитель бензол не более чем 0,5 см.          как антидотаого препарата.
После того как фронт растворителя поднимается на 10 см.,                Второй мышке также вводится раствор хлорофоса в летальной
пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько             дозе, а контрольной - растворитель хлорофоса в этом же объеме, что и
минут для испарения растворителя. Пластинку вновь                 опытной.
помещают в камеру для хроматографирования с                             После смерти опытной мышки, вскрыть и просмотреть
подвижным растворителем (смесь гексана с ацетоном 1 : 1 )         паталогоанатомические изменения ЦНС и внутренних органов.
и хроматографируют как указана выше. Высушенную пла-              Результаты органов записать.
стинку опрыскивают проявляющим реактивом (1 % раствор                   Ферментный метод определения фосфорорганических
резорцина в 10% растворе КОН и помещают в сушильный               пестицидов в патматериале.
шкаф при Т-100 0С до появления оранжево-красных пятен.                   Реактивы:
      КАЧЕСТВЕННАЯ                   РЕАКЦИЯ                НА          1. Основной индикаторно- буферный раствор (р-р №1)
МЕТИЛЭТИЛТИОФОС. Проводится как с хлорофосом, но                        2. Индикаторно-буферный раствор (р-р №2)
при прибавлении молибдата аммония и азотной кислоты                     3. Индикаторно-буферный раствор ацетилхолина (р-р ЖЗ)
выпадает осадок зеленого цвета, который переходит при                   4. Холиноетераза или сыворотка крови лошади.
нагревании в желтый цвет.
      ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ                        ОТРАВЛЕНИЕ              ОПИСАНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ: 20 грамм материала
ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ.                                            измельчают, заливают равным количеством хлороформа и
      (2   мышки,       крысы,    кролик,     кошки)     путем    экстрагируют 1 час периодически перемешивая. Затем пипеткой
парэнтериалъного введения хлорофоса из расчета от 500 до          набирают 1 мл хлороформенного экстракта и переносят в
1000 мг/ кг веса животного в зависимости от вида: кролика         химический стаканчик или пробирку. В контрольный стаканчик
- 650 мг/ кг                                                      (пробирку) вносят 1 мл хлороформа. Оба стаканчика помещают в
     кошкам - 800 мг/ кг                                          водяную баню на 3 мин. После этого стаканчик охлаждают до
     крысам -1000 мг/кг.                                          комнатной температуры и вносят в них по 1 мл раствора
     При постановке биологической пробы изучают                   холинэстераза или сыворотку крови лошади. Содержимое хорошо
токсические свойства хлорофоса, клинические признаки и            перемешивают и ставят стаканчики в водяную баню (38-39) на 30
антидотную терапию при отравлениях ФОС (атропинасульфат,          мин. Затем в две пробирки берут по 0,5 мл содержимого
фосфалит, ТМБ-4, тропацин, аминазин)                              стаканчика, прибавляют по 4,5 мл раствора № 3 и отмечают время.