Хроматографические методы в анализе лекарственных и токсичных веществ. Стоянова О.Ф - 41 стр.

UptoLike

41
размер пластин , толщину слоя сорбента, объем пробы , длину пути фронта
растворителя и другие факторы . При соблюдении стандартных условий
получаются воспроизводимые значения R
f
, которые можно использовать в
аналитических целях при сравнении с табличными, если они получены в
тех же условиях опыта.
Самым надежным является метод свидетелей , когда на стартовую
линию рядом с пробой наносятся индивидуальные вещества,
соответствующие предполагаемым компонентам смеси. Влияние
различных факторов на все вещества будет одинаковым, поэтому
совпадение R
f
компонента пробы и одного из свидетелей дает основания
для отождествления веществ . Несовпадение R
f
указывает на отсутствие в
пробе соответствующего компонента.
Качественный состав пробы в методе бумажной хроматографии так
же, как и в ТСХ , может быть установлен или по специфической окраске
отдельных пятен на хроматограмме, или по числовому значению R
f
каждого компонента.
Количественный анализ
Количественные определения в ТСХ могут быть сделаны или
непосредственно на пластинке, или после удаления вещества с нее. При
непосредственном определении на пластинке измеряют площадь пятна и
по заранее построенному градуировочному графику находят количество
вещества. Наиболее точным считается метод , в котором вещество после
разделения удаляется с пластинки и анализируется
спектрофотометрическим или иным методом . Удаление вещества с
пластинки обычно производят механическим путем или вымывают
подходящим растворителем .
Количественные определения в бумажной хроматографии также
выполняются или по хроматографическим характеристикам (площадь
пятна и интенсивность его окраски), или по методу вымывания . Нередко
хроматограмму разрезают на отдельные части по числу пятен, каждое
пятно обрабатывают соответствующим экстрагентом и определяют
количество экстрагированного вещества любым подходящим методом
( фотометрическим , полярографическим и т. д .).
Лабораторная работа 1.
Определение примеси гидразина в изониазиде (гидразиде кислоты
изоникотиновой ) методом хроматографии
в тонком слое сорбента (ТСХ )
Цель работы: приобретение навыков работы с оборудованием для
тонкослойной хроматографии; ознакомление с приемами качественной и
                                          41
раз мер пластин, толщ инуслоя сорбента, объем пробы , д линупути фронта
раств орителя и д ругие факторы . П ри соблюд ении станд артны х услов ий
получаются в оспроиз в од им ы е з начения Rf, которы е можноиспольз ов ать в
аналитических целя х при срав нении с табличны ми, если они получены в
тех же услов ия х опы та.
       Самы м над ежны м я в ля ется метод св ид етелей, когда на стартов ую
линию ря д ом с пробой нанося тся инд ив ид уальны е в ещ еств а,
соотв етств ующ ие пред полаг     аемы м      компонентам смеси. В лия ние
раз личны х факторов на в се в ещ еств а буд ет од инаков ы м , поэ тому
сов пад ение R f ком понента пробы и од ног     оиз св ид етелей д ает основ ания
д ля отожд еств ления в ещ еств . Н есов пад ение Rf указ ы в ает на отсутств ие в
пробе соотв етств ующ егокомпонента.
       К ачеств енны й состав пробы в метод е бумажной хроматог        рафии так
же, как и в Т СХ , может бы ть установ лен или поспецифической окраске
отд ельны х пя тен на хроматог      рамме, или по числов ому з начению Rf
кажд ог окомпонента.

                            Коли ч е ст ве нны й а на ли з

        К оличеств енны е опред еления в Т СХ мог    ут бы ть сд еланы или
непосред ств еннона пластинке, или после уд аления в ещ еств а с нее. П ри
непосред ств енном опред елении на пластинке из меря ют площ ад ь пя тна и
по з аранее построенному г     рад уиров очном у г
                                                 рафику наход я т количеств о
в ещ еств а. Н аиболее точны м считается метод , в котором в ещ еств о после
раз д еления       уд аля ется     с      пластинки     и       анализ ируется
спектрофотометрическим или ины м метод ом. У д аление в ещ еств а с
пластинки обы чно произ в од я т механическим путем или в ы м ы в ают
под ход я щ им раств орителем.
        К оличеств енны е опред еления в бумажной хроматог       рафии также
в ы полня ются или по хроматог       рафическим характеристикам (площ ад ь
пя тна и интенсив ность егоокраски), или пометод ув ы мы в ания . Н еред ко
хроматограмму раз рез ают на отд ельны е части по числу пя тен, кажд ое
пя тно обрабаты в ают соотв етств ующ им э кстраг     ентом и опред еля ют
количеств о э кстраг   иров анного в ещ еств а любы м под ход я щ им метод ом
(фотометрическим, поля рографическим и т.д .).


                           Ла б ора т орна я ра б от а № 1.

  О п ре де ле ни е п ри ме си ги дра зи на в и зони а зи де (ги дра зи де ки слот ы
                  и зони кот и новой ) ме т одом хрома т огра фи и
                          в т онком слое сорб е нт а (ТС Х )

     Ц е ль ра бот ы : приобретение нав ы ков работы с оборуд ов анием д ля
тонкослойной хроматог    рафии; оз накомление с приемам и качеств енной и