ВУЗ:
Рубрика:
41
размер пластин , толщину слоя сорбента, объем пробы , длину пути фронта
растворителя и другие факторы . При соблюдении стандартных условий
получаются воспроизводимые значения R
f
, которые можно использовать в
аналитических целях при сравнении с табличными, если они получены в
тех же условиях опыта.
Самым надежным является метод свидетелей , когда на стартовую
линию рядом с пробой наносятся индивидуальные вещества,
соответствующие предполагаемым компонентам смеси. Влияние
различных факторов на все вещества будет одинаковым, поэтому
совпадение R
f
компонента пробы и одного из свидетелей дает основания
для отождествления веществ . Несовпадение R
f
указывает на отсутствие в
пробе соответствующего компонента.
Качественный состав пробы в методе бумажной хроматографии так
же, как и в ТСХ , может быть установлен или по специфической окраске
отдельных пятен на хроматограмме, или по числовому значению R
f
каждого компонента.
Количественный анализ
Количественные определения в ТСХ могут быть сделаны или
непосредственно на пластинке, или после удаления вещества с нее. При
непосредственном определении на пластинке измеряют площадь пятна и
по заранее построенному градуировочному графику находят количество
вещества. Наиболее точным считается метод , в котором вещество после
разделения удаляется с пластинки и анализируется
спектрофотометрическим или иным методом . Удаление вещества с
пластинки обычно производят механическим путем или вымывают
подходящим растворителем .
Количественные определения в бумажной хроматографии также
выполняются или по хроматографическим характеристикам (площадь
пятна и интенсивность его окраски), или по методу вымывания . Нередко
хроматограмму разрезают на отдельные части по числу пятен, каждое
пятно обрабатывают соответствующим экстрагентом и определяют
количество экстрагированного вещества любым подходящим методом
( фотометрическим , полярографическим и т. д .).
Лабораторная работа № 1.
Определение примеси гидразина в изониазиде (гидразиде кислоты
изоникотиновой ) методом хроматографии
в тонком слое сорбента (ТСХ )
Цель работы: приобретение навыков работы с оборудованием для
тонкослойной хроматографии; ознакомление с приемами качественной и
41 раз мер пластин, толщ инуслоя сорбента, объем пробы , д линупути фронта раств орителя и д ругие факторы . П ри соблюд ении станд артны х услов ий получаются в оспроиз в од им ы е з начения Rf, которы е можноиспольз ов ать в аналитических целя х при срав нении с табличны ми, если они получены в тех же услов ия х опы та. Самы м над ежны м я в ля ется метод св ид етелей, когда на стартов ую линию ря д ом с пробой нанося тся инд ив ид уальны е в ещ еств а, соотв етств ующ ие пред полаг аемы м компонентам смеси. В лия ние раз личны х факторов на в се в ещ еств а буд ет од инаков ы м , поэ тому сов пад ение R f ком понента пробы и од ног оиз св ид етелей д ает основ ания д ля отожд еств ления в ещ еств . Н есов пад ение Rf указ ы в ает на отсутств ие в пробе соотв етств ующ егокомпонента. К ачеств енны й состав пробы в метод е бумажной хроматог рафии так же, как и в Т СХ , может бы ть установ лен или поспецифической окраске отд ельны х пя тен на хроматог рамме, или по числов ому з начению Rf кажд ог окомпонента. Коли ч е ст ве нны й а на ли з К оличеств енны е опред еления в Т СХ мог ут бы ть сд еланы или непосред ств еннона пластинке, или после уд аления в ещ еств а с нее. П ри непосред ств енном опред елении на пластинке из меря ют площ ад ь пя тна и по з аранее построенному г рад уиров очном у г рафику наход я т количеств о в ещ еств а. Н аиболее точны м считается метод , в котором в ещ еств о после раз д еления уд аля ется с пластинки и анализ ируется спектрофотометрическим или ины м метод ом. У д аление в ещ еств а с пластинки обы чно произ в од я т механическим путем или в ы м ы в ают под ход я щ им раств орителем. К оличеств енны е опред еления в бумажной хроматог рафии также в ы полня ются или по хроматог рафическим характеристикам (площ ад ь пя тна и интенсив ность егоокраски), или пометод ув ы мы в ания . Н еред ко хроматограмму раз рез ают на отд ельны е части по числу пя тен, кажд ое пя тно обрабаты в ают соотв етств ующ им э кстраг ентом и опред еля ют количеств о э кстраг иров анного в ещ еств а любы м под ход я щ им метод ом (фотометрическим, поля рографическим и т.д .). Ла б ора т орна я ра б от а № 1. О п ре де ле ни е п ри ме си ги дра зи на в и зони а зи де (ги дра зи де ки слот ы и зони кот и новой ) ме т одом хрома т огра фи и в т онком слое сорб е нт а (ТС Х ) Ц е ль ра бот ы : приобретение нав ы ков работы с оборуд ов анием д ля тонкослойной хроматог рафии; оз накомление с приемам и качеств енной и
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 39
- 40
- 41
- 42
- 43
- …
- следующая ›
- последняя »