Хроматографические методы в анализе лекарственных и токсичных веществ. Стоянова О.Ф - 42 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВГУ | Воронеж

Составители: 

Рубрика: 

42
количественной обработки хроматограмм, полученных на пластине для
ТСХ .
Оборудование и реактивы :
1. Камера для ТСХ с притертой крышкой .
2. Микрошприцы на 10 мкл.
3. Мерные колбы емкостью 10 мл.
4. Мерный цилиндр емкостью 25 мл.
5. Пластины для ТСХ « Силуфол » .
6. Пульверизатор .
7. Термостат воздушный (t=105
о
С).
8. Весы аналитические .
9. Калька, миллиметровая бумага , линейка, лупа с делениями,
карандаш .
10. Изониазид , С
5
Н
4
NCONHNH
2
(технический ).
11. Гидразина сульфат, (N
2
H
6
)SO
4
(«хч» или « чда»).
12. Ацетон , CH
3
COCH
3
(«ч»).
13. п-Диметиламинобензальдегид ,(СH
3
)
2
NC
6
H
4
CHO, 1%-ный раствор
в 95%-ном этиловом спирте .
Выполнение работы
Приготовление элюента и подготовка камеры для ТСХ
Хроматографирование проводят в специальных камерах для ТСХ –
стеклянных круглых или прямоугольных емкостях с притертой крышкой .
На дно камеры наливают подвижную фазу – элюент. Элюентом в данной
работе является смесь ацетон – вода в соотношении 49:1. Смесь готовят в
колбе с притертой пробкой смешением 24,5 мл ацетона и 0,5 мл воды
(можно приготовить сразу в камере и перемешать). Высота слоя элюента в
камере должна быть около 0,5 см . Камера с элюентом , плотно закрытая
крышкой , должна некоторое время постоять, чтобы пространство
насытилось парами элюента для ускорения процесса
хроматографирования .
Приготовление растворителя
В качестве растворителя применяют смесь ацетон – вода 1:1
объемом 30 мл. Для этого в колбу с притертой пробкой отмеривают
цилиндром 15 мл ацетона и 15 мл воды , все хорошо перемешивают.
Приготовление раствора исследуемого вещества (изониазида)
Навеску изониазида массой 1 г, взятую с точностью до 0,01 г вносят
в мерную колбу емкостью 10 мл и доводят до метки приготовленным
растворителем (смесью ацетон - вода). Полученный раствор тщательно
перемешивают.
Приготовление стандартного раствора примеси
Навеску гидразина сульфата массой 0,05 г растворяют в мерной
колбе емкостью 10 мл в смеси ацетон - вода 1:1. Полученный раствор имеет
концентрацию по гидразину сульфату 0,5 %. 
                                         42
количеств енной обработки хроматог      рамм, полученны х на пластине д ля
Т СХ .
       О борудова ни е и ре а кт и вы :
       1. К амерад ля Т СХ с притертой кры ш кой.
       2. М икрош прицы на10 мкл.
       3. М ерны е колбы ем костью 10 м л.
       4. М ерны й цилинд р емкостью 25 мл.
       5. П ластины д ля Т СХ «Силуфол».
       6. П ульв ериз атор.
       7. Т ермостатв озд уш ны й (t=105 оС).
       8. В есы аналитические.
       9. К алька, м иллиметров ая бумаг    а, линейка, лупа с д еления ми,
           каранд аш .
       10. И з ониаз ид , С5 Н 4NCONHNH2 (технический).
       11. Гид раз инасульфат, (N2 H6)SO4 («хч» или «чд а»).
       12. А цетон, CH3COCH3 («ч»).
       13. п-Д иметилам инобенз альд егид ,(СH3 )2NC6 H4 CHO, 1%-ны й раств ор
           в 95%-ном э тилов ом спирте.

      Вы полне ни е ра бот ы

       П риг отов ление э люентаи под готов какамеры д ля Т СХ
       Х роматографиров ание пров од я т в специальны х камерах д ля Т СХ –
стекля нны х круглы х или пря моугольны х емкостя х с притертой кры ш кой.
Н а д нокамеры налив ают под в ижную фаз у– э люент. Э люентом в д анной
работе я в ля ется смесь ацетон – в од а в соотнош ении 49:1. Смесь г      отов я т в
колбе с притертой пробкой смеш ением 24,5 мл ацетона и 0,5 мл в од ы
(можноприг     отов итьсраз ув камере и перемеш ать). В ы сотаслоя э люента в
камере д олжна бы ть около 0,5 см . К амера с э люентом, плотноз акры тая
кры ш кой, д олжна некоторое в ремя постоя ть, чтобы пространств о
насы тилось        парами       э люента        д ля     ускорения        процесса
хроматографиров ания .
       П риг отов ление раств орителя
       В качеств е раств орителя применя ют смесь ацетон – в од а 1:1
объемом 30 мл. Д ля э того в колбу с притертой пробкой отмерив ают
цилинд ром 15 мл ацетонаи15 м л в од ы , в се хорош оперемеш ив ают.
        П риготов ление раств ораисслед уемог     ов ещ еств а(из ониаз ид а)
       Н ав ескуиз ониаз ид амассой 1 г, в з я тую с точностью д о0,01 г в нося т
в мерную колбу емкостью 10 мл и д ов од я т д о метки приг            отов ленны м
раств орителем (смесью ацетон-в од а). П олученны й раств ор тщ ательно
перемеш ив ают.
       П риг отов ление станд артног ораств орапримеси
       Н ав еску г ид раз ина сульфата массой 0,05 г раств оря ют в мерной
колбе емкостью 10 м л в смеси ацетон-в од а1:1. П олученны й раств ор имеет
концентрацию пог      ид раз инусульфату0,5 %.

Страницы