Применение компонентов крови. Сухоруков В.П. - 131 стр.

       Наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагента на пластинку или планшет. Нано-
сят рядом маленькую каплю (0,02-0,03 мл) исследуемых эритроцитов. Тщательно смеши-
вают реагент с эритроцитами стеклянной палочкой.
                                         - 11 -
       Через 10-20 с. мягко покачивают пластинку. Несмотря на то, что четкая агглютинация
наступает в первые 30 с., результаты реакции учитывают через 3 мин. после смешивания.
       При наличии агглютинации исследуемая кровь маркируется как резус положитель-
ная, при отсутствии - как резус отрицательная.
       Для определения резус - принадлежности ускоренным методом на плоскости при ком-
натной температуре могут быть использованы поликлональные сыворотки анти-D с неполны-
ми антителами, приготовленные в комбинации с коллоидами (альбумином, полиглюкином).
                 3.2.2. Метод конглютинации с 10%-ным желатином:
       Используют реагенты, содержащие неполные поликлональные антитела (сыворот-
ки анти-D) или неполные моноклональные антитела (цоликлоны анти-D).
       В 2 пробирки вносят по 0,02-0,03 мл осадка эритроцитов, для чего выдавливают из
пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки. Затем в первую
пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) реагента, во вторую
(контрольную) пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) физиоло-
гического раствора.
       Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, после чего их помещают в
водяную баню на 15 мин. или термостат на 30 мин. при температуре +46 - 48 град. С. По
истечении указанного времени в пробирки добавляют по 5-8 мл физиологического рас-
твора и перемешивают содержимое путем 1-2-кратного переворачивания пробирок.
       Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или
через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что исследуемый образец
крови резус положительный, отсутствие агглютинации - о том, что испытуемая кровь резус
отрицательная. В контрольной пробирке агглютинация эритроцитов должна отсутствовать.
       Для определения резус-принадлежности ускоренным методом в пробирке
при комнатной температуре может быть использован универсальный реагент,
                                         - 12 -
представляющий собой сыворотку анти-D с неполными антителами, разведенную 33%-
ным полиглюкином.
       4. Пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента
       Проба на индивидуальную совместимость позволяет убедиться в том, что у реци-
пиента нет антител, направленных против эритроцитов донора, и таким образом предот-
вратить трансфузию эритроцитов, несовместимых с кровью больного.
       Проба на совместимость, выполняемая на плоскости при комнатной температуре,
имеет целью выявить у реципиента полные групповые агглютинины системы AB0, MNSs,
Lewis и др. Проба на совместимость с применением 10%-го желатина, 33%-го полиглюки-
на, непрямая проба Кумбса предназначена для выявления у реципиента неполных группо-
вых антител. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином предусматривает выявле-
ние и тех и других антител, в том числе групповых гемолизинов.
       Наиболее чувствительной и рекомендуемой является двухэтапная проба в пробир-
ках с антиглобулином, затем комбинация двух проб - пробы на плоскости при комнатной
температуре и непрямой пробы Кумбса. Вместо непрямой пробы Кумбса может быть
применена реакция конглютинации с 10%-ным желатином или реакция конглютинации с
33%-ным полиглюкином. Последняя проба уступает по чувствительности первым двум,
однако занимает меньше времени.
                4.1. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином
       Первый этап. В маркированную пробирку вносят 2 объема (200 мкл) сы-
воротки реципиента и 1 объем (100 мкл) 2%-ной взвеси трижды отмытых

                                          131