Применение компонентов крови. Сухоруков В.П. - 132 стр.

эритроцитов донора, суспендированных в физиологическом растворе или LISS
(раствор низкой ионной силы). Содержимое пробирки перемешивают и
                                        - 13 -
центрифугируют при 2500 об./мин. (около 600 g) в течение 30 с. Затем оценивают наличие
гемолиза в надосадочной жидкости, после чего осадок эритроцитов ресуспендируют,
слегка постукивая кончиком пальца по дну пробирки, и определяют наличие агглютина-
ции эритроцитов. При отсутствии выраженного гемолиза и / или агглютинации переходят
к выполнению второго этапа пробы с использованием антиглобулиновой сыворотки.
       Второй этап. Пробирку помещают в термостат при температуре 37 град. С на 30
мин., после чего снова оценивают наличие гемолиза и / или агглютинации эритроцитов.
Затем эритроциты трижды отмывают физиологическим раствором, добавляют 2 объема
(200 мкл) антиглобулиновой сыворотки для пробы Кумбса и перемешивают. Пробирки
центрифугируют в течение 30 с., осадок эритроцитов ресуспензируют и оценивают нали-
чие агглютинации.
       Учет результатов проводят невооруженным глазом или через лупу. Выраженный
гемолиз и/или агглютинация эритроцитов указывает на присутствие в сыворотке реципи-
ента групповых гемолизинов и / или агглютининов, направленных против эритроцитов
донора, и свидетельствует о несовместимости крови реципиента и донора. Отсутствие ге-
молиза и / или агглютинации эритроцитов свидетельствует о совместимости крови реци-
пиента и донора.
        4.2. Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре
       На пластинку наносят 2-3 капли сыворотки реципиента и добавляют небольшое ко-
личество эритроцитов с таким расчетом, чтобы соотношение эритроцитов и сыворотки
было 1:10 (для удобства рекомендуется сначала выпустить через иглу несколько капель
эритроцитов из контейнера на край пластинки, затем оттуда стеклянной палочкой перене-
сти маленькую каплю эритроцитов в сыворотку). Далее эритроциты перемешивают с сы-
вороткой, пластинку слегка покачивают в течение 5 мин., наблюдая за ходом реакции. По
истечении указанного времени в реагирующую смесь можно добавить 1-2 капли физио-
                                        - 14 -
логического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов.
       Учет результатов. Наличие агглютинации эритроцитов означает, что кровь донора
несовместима с кровью реципиента и не должна быть ему перелита. Если по истечении 5
мин. агглютинация эритроцитов отсутствует, то это означает, что кровь донора совмести-
ма с кровью реципиента по групповым агглютиногенам.
                             4.3. Непрямая проба Кумбса
       В пробирку вносят одну каплю (0,02 мл) осадка трижды отмытых эритроцитов до-
нора, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна
пробирки, и добавляют 4 капли (0,2 мл) сыворотки реципиента. Содержимое пробирок пе-
ремешивают встряхиванием, после чего их помещают на 45 мин. в термостат при темпе-
ратуре +37 град. С. По истечении указанного времени эритроциты вновь трижды отмыва-
ют и готовят 5%-ную взвесь в физиологическом растворе. Далее 1 каплю (0,05 мл) взвеси
эритроцитов на фарфоровую пластинку, добавляют 1 каплю (0,05 мл) антиглобулиновой
сыворотки и перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку периодически покачивают в
течение 5 мин.
       Учет результатов проводят невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация
эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсут-
ствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.
           4.4. Проба на совместимость с применением 10%-го желатина
      В пробирку вносят 1 небольшую каплю (0,02-0,03 мл) эритроцитов до-
нора, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и ка-
саются ею дна пробирки, добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1

                                         132