ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
87
Ход работы:
1. Нанесение образца на пластинку. На пластинку с гото-
вым слоем сорбента (силуфол) острой иглой проводят стартовую
линию на расстоянии 2см от нижнего края. На стартовую линию
наносят тонким капилляром (2мкл) пробу исследуемого раствора
и пробы индивидуальных компонентов, входящих в состав сме-
си. Расстояние между каплями должно быть не менее 1см. Для
надежности идентификации капли подсушивают.
2. Получение хроматограммы. Пластинку вертикально по-
мещают в камеру для хроматографирования. Нижний край ее
погружают в растворитель не более, чем на 5мм. Хроматографи-
рование продолжают 1,5 – 2 часа. После этого пластинку высу-
шивают и отмечают линию фронта.
3. Обнаружение катионов. Для обнаружения хромато-
грамму вначале опрыскивают 2%-ным раствором KJ, высуши-
вают, держат над парами концентрированного аммиака, затем
обрабатывают 10%-ным (NH
4
)
2
S. Появление характерной окра-
ски пятен подтверждает наличие катионов в исследуемой смеси.
Таблица 4.3.
Катион Проявитель Окраска пятна
Hg(II) KJ Красная
Hg(II) (NH
4
)
2
S Коричнево-черная
Bi(III) KJ Желто-коричневая
Bi(III) (NH
4
)
2
S Коричнево-черная
Cd(II) KJ Бесцветная
Cd(II) (NH
4
)
2
S Желтая
Pb(II) KJ Желтая
Pb(II) (NH
4
)
2
S Коричневая
Cu(II) KJ Коричневая
Cu(II) (NH
4
)
2
S Темно-коричневая
IV.3.5. Разделение смесей красителей методом ТСХ
Приборы и реактивы:
Красители, 0,1 – 100мкг/мл;.
Растворитель: тетрохлорид углерода – хлороформ (1:5);
Силуфол;
88
Хроматографическая камера с крышкой;
Капилляры.
Выполнение работы:
Красители – азобензол, судан красный, бриллиантовый зе-
леный (свидетели) и раствор, содержащий неизвестные красите-
ли, наносят на линию старта на расстояние 1,5 – 2,0 см от края
пластинки осторожным прикосновением капилляра. Линия стар-
та осторожно отмечается карандашом. Затем пластинку поме-
щают в хроматографическую камеру под углом 15
0
– 20
0
в рас-
творитель. Линия старта не должна погружаться в растворитель.
Разделение заканчивается, когда растворитель не доходит
на 1 – 2 см до верхнего края пластинки. Затем пластинку выни-
мают, сушат на воздухе и измеряют расстояние от линии старта
до центра пятна. Вычисляют R
s
и делают вывод о качественном
составе хроматографируемой смеси.
IV.4. Бумажная хроматография
По механизму разделения хроматография на бумаге явля-
ется распределительной. Метод основан на различии в коэффи-
циентах распределения между двумя несмешивающимися фаза-
ми. Неподвижной фазой является специальная хроматографиче-
ская бумага, которая служит носителем. Подвижная фаза про-
двигается вдоль листа бумаги, главным образом благодаря ка-
пиллярным силам. Для количественной оценки подвижности
вещества в хроматографической системе используют параметр
степень (критерий) разделения R
s
. Значение R
s
определяют, как
и в тонкослойной хроматографии. На подвижность вещества в
условиях хроматографии на бумаге влияет не только коэффици-
ент распределения, но и взаимодействие их с волокнами, усло-
вие проведения эксперимента и характеристика бумаги. Мето-
дика хроматографирования на бумаге аналогична методике про-
ведения тонкослойной хроматографии. Для получения хромато-
граммы лист бумаги после нанесения пробы помещают в сосуд с
элюентом. Растворитель вследствие капиллярных сил продвига-
ется по бумаге, разделяя пробу на компоненты.
Ход работы: Хроматографическая камера с крышкой;
1. Нанесение образца на пластинку. На пластинку с гото- Капилляры.
вым слоем сорбента (силуфол) острой иглой проводят стартовую Выполнение работы:
линию на расстоянии 2см от нижнего края. На стартовую линию Красители – азобензол, судан красный, бриллиантовый зе-
наносят тонким капилляром (2мкл) пробу исследуемого раствора леный (свидетели) и раствор, содержащий неизвестные красите-
и пробы индивидуальных компонентов, входящих в состав сме- ли, наносят на линию старта на расстояние 1,5 – 2,0 см от края
си. Расстояние между каплями должно быть не менее 1см. Для пластинки осторожным прикосновением капилляра. Линия стар-
надежности идентификации капли подсушивают. та осторожно отмечается карандашом. Затем пластинку поме-
2. Получение хроматограммы. Пластинку вертикально по- щают в хроматографическую камеру под углом 150 – 200 в рас-
мещают в камеру для хроматографирования. Нижний край ее творитель. Линия старта не должна погружаться в растворитель.
погружают в растворитель не более, чем на 5мм. Хроматографи- Разделение заканчивается, когда растворитель не доходит
рование продолжают 1,5 – 2 часа. После этого пластинку высу- на 1 – 2 см до верхнего края пластинки. Затем пластинку выни-
шивают и отмечают линию фронта. мают, сушат на воздухе и измеряют расстояние от линии старта
3. Обнаружение катионов. Для обнаружения хромато- до центра пятна. Вычисляют Rs и делают вывод о качественном
грамму вначале опрыскивают 2%-ным раствором KJ, высуши- составе хроматографируемой смеси.
вают, держат над парами концентрированного аммиака, затем
обрабатывают 10%-ным (NH4)2S. Появление характерной окра- IV.4. Бумажная хроматография
ски пятен подтверждает наличие катионов в исследуемой смеси.
По механизму разделения хроматография на бумаге явля-
Таблица 4.3. ется распределительной. Метод основан на различии в коэффи-
Катион Проявитель Окраска пятна циентах распределения между двумя несмешивающимися фаза-
Hg(II) KJ Красная ми. Неподвижной фазой является специальная хроматографиче-
Hg(II) (NH4)2S Коричнево-черная ская бумага, которая служит носителем. Подвижная фаза про-
Bi(III) KJ Желто-коричневая двигается вдоль листа бумаги, главным образом благодаря ка-
Bi(III) (NH4)2S Коричнево-черная пиллярным силам. Для количественной оценки подвижности
Cd(II) KJ Бесцветная вещества в хроматографической системе используют параметр
Cd(II) (NH4)2S Желтая степень (критерий) разделения Rs. Значение Rs определяют, как
Pb(II) KJ Желтая и в тонкослойной хроматографии. На подвижность вещества в
Pb(II) (NH4)2S Коричневая условиях хроматографии на бумаге влияет не только коэффици-
Cu(II) KJ Коричневая ент распределения, но и взаимодействие их с волокнами, усло-
Cu(II) (NH4)2S Темно-коричневая вие проведения эксперимента и характеристика бумаги. Мето-
дика хроматографирования на бумаге аналогична методике про-
ведения тонкослойной хроматографии. Для получения хромато-
IV.3.5. Разделение смесей красителей методом ТСХ
граммы лист бумаги после нанесения пробы помещают в сосуд с
элюентом. Растворитель вследствие капиллярных сил продвига-
Приборы и реактивы:
ется по бумаге, разделяя пробу на компоненты.
Красители, 0,1 – 100мкг/мл;.
Растворитель: тетрохлорид углерода – хлороформ (1:5);
Силуфол;
87 88
