Биотехнология: Монография. Волова Т.Г. - 79 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

СФУ | Красноярск

Составители: 

Рубрика: 

78
робными клетками. Витамины принимают активное участие во многих
процессах метаболизма человека и высших животных (процессы цикла
трикарбоновых кислот, распад и синтез жирных кислот, синтез аминокис-
лот и др.), оказывая влияние на разнообразные физиологические процес-
сы.
Микробиологическим путем получают некоторые витамины группы B,
а также эргостерин и каротин, являющиеся, соответственно, предшест-
венниками витаминов
D
2
и провитамина A.
Получение витамина В
12
Витамин В
12
– (α-5,6-диметилбензимидазол)-цианкобаламин – поли-
мер сложного строения, являющийся гематопоэтическим и ростовым фак-
тором для многих животных и микроорганизмов. Микробиологический
синтез является единственным способом получения данного витамина.
Способность к синтезу данного витамина широко распространена среди
прокариотических микроорганизмов. Активно продуцируют витамин В
12
Propionibacterium, а также Pseudomonas и смешанные культуры матанооб-
разующих бактерий. Получение витамина на основе пропионовокислых
бактерий, способных к самостоятельному синтезу аденозилкобаламина 5,6
ДМБ (коэнзима В
12
), осуществляется в две стадии в двух последователь-
ных аппаратах объемом 500 л при коэффициенте заполнения 0.65–0.70.
Первую стадию культивирования проводят в течение 80 ч и слабом пере-
мешивании в анаэробных условиях до полной утилизации сахара; полу-
ченную биомассу центрифугируют. Сгущенную суспензию инкубируют
во втором аппарате еще в течение 88 ч, аэрируя культуру воздухом (2
м
3
/ч). Среда содержит сахара (обычно глюкозу 1–10 %), добавки солей
железа, марганца, магния и кобальта (10–100 мг/л), кукурузный экстракт
(3–7 %). В качестве источника азота принят (NH
4
)
2
SO
4
. Ферментацию
проводят при 30°С, рН стабилизируют на уровне 6.5–7.0 подтитровкой
культуры раствором (NH)
4
OH. На второй стадии происходит образование
ДМБ. После завершения ферментации витамин экстрагируют из клеток,
нагреванием в течение 10–30 минут при 80–120°С. При последующей об-
работке горячей клеточной суспензии цианидом происходит образование
CN-кобаламина; продукт сорбируют, пропуская раствор через активиро-
ванный уголь и окислы алюминия; затем элюируют водным спиртом или
хлороформом. После выпаривания растворителя
получают кристалличе-
ский витамин. Выход В
12
составляет до 40 мг/л.
Активными продуцентами В
12
являются бактерии рода Pseudomonas.
Разработаны эффективные технологии на основе термофильных бацилл
Bacillus circulans, в течение 18 ч при 65–75°С в нестерильных условиях.
Выход витамина составляет от 2.0 до 6.0 мг/л. Бактерии выращивают на
богатых средах, приготовленных на основе соевой и рыбной муки, мясно-
го и кукурузного экстракта. Продукция В
12
для медицины составляет око-
ло 12 т/г; форма выпуска – стерильный раствор CN-В
12
на основе 0.95-го

Страницы