Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 65 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

МарГУ | Йошкар-Ола

Составители: 

Рубрика: 

65
Таблица 22
Построение калибровочной кривой
№ колб
Объем раствора
белка
(альбумина), мл
Объем
0,1н NаОН, мл
Концентрация
белка, мкг
Показания
прибора
(ФЭК)
1
1
0
500
2
1
x
0,5
x
333,3
3
1
x
1
x
250
4
1
x
0,5
x
200
5
1
x
2
x
167
6
1
2,5
143
7
1
3
125
8
1
3,5
111
9
1
4
100
10
1
4,5
91
11
1
5
83
12
1
6
71
13
1
7
63
14
1
8
56
15
1
9
50
х – следует увеличить объем альбумина и щелочи в одинаковых пропорциях (в 2–3 раза).
Пример: 0,5 г навески растирают и доводят до 10 мл, непосредственно для опре-
деления белка берут 1 мл вытяжки и получают разбавление равное 10 (Е
1
=10) - 1 мл вытяж-
ки содержит 0,5:10=0,05 г навески. Данное количество вытяжки (1 мл) превращают в
осадок, который растворяют 0,1 мл 0,1н раствора NаОН и разбавляют 3 мл воды
(общий объем будет равен 3,1 мл) - в этом случае имеют второе разбавление, равное
Е
2
=3,1. Для анализа берут 1 мл щелочного раствора белка, но дальнейшего разбавле-
ния уже не происходит. Поэтому общее разбавление будет составлять: Е=Е
1
×Е
2
=
10×3,1=31.
5. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 23.
Таблица 23
Определение содержания белка
Вари-
анты
опыта
№
колб
Показания
прибора
Содержа-
ние белка
по калиб-
ровочной
кривой
Содержание белка
мкг/г сухой
массы
мкг/%
П р и г о т о в л е н и е р е а к т и в о в :
реактив А (2%-ный раствор карбоната натрия в 0,1н растворе щелочи): 20 г
безводного карбоната натрия растворяют в 1 л 0,1н раствора щелочи;
реактив В: 1%-ный раствор сульфата меди (Cu SO
4
·5H
2
O);
реактив Д: 2%-ный раствор цитрата натрия; 
                                                                         Таблица 22
                    Построение калибровочной кривой
            Объем раствора                                               Показания
                                       Объем          Концентрация
№ колб           белка                                                    прибора
                                   0,1н NаОН, мл       белка, мкг
            (альбумина), мл                                                (ФЭК)
   1                1                    0                   500
   2                1x                  0,5x                333,3
   3                1x                   1x                  250
   4                1x                  0,5x                 200
   5                1x                   2x                  167
   6                1                   2,5                  143
   7                1                    3                   125
   8                1                   3,5                  111
   9                1                    4                   100
  10                1                   4,5                  91
  11                1                    5                   83
  12                1                    6                   71
  13                1                    7                   63
  14                1                    8                   56
  15                1                    9                   50
х – следует увеличить объем альбумина и щелочи в одинаковых пропорциях (в 2–3 раза).
          Пример: 0,5 г навески растирают и доводят до 10 мл, непосредственно для опре-
деления белка берут 1 мл вытяжки и получают разбавление равное 10 (Е1=10) - 1 мл вытяж-
ки содержит 0,5:10=0,05 г навески. Данное количество вытяжки (1 мл) превращают в
осадок, который растворяют 0,1 мл 0,1н раствора NаОН и разбавляют 3 мл воды
(общий объем будет равен 3,1 мл) - в этом случае имеют второе разбавление, равное
Е2=3,1. Для анализа берут 1 мл щелочного раствора белка, но дальнейшего разбавле-
ния уже не происходит. Поэтому общее разбавление будет составлять: Е=Е1×Е2 =
10×3,1=31.
          5. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 23.
                                                                         Таблица 23
                         Определение содержания белка
 Вари-      №        Масса       Показания      Содержа-        Содержание белка
  анты     колб    навески, г     прибора       ние белка
 опыта                                          по калиб-     мкг/г сухой     мкг/%
                                                ровочной        массы
                                                 кривой


         Приготовление реактивов:
         реактив А (2%-ный раствор карбоната натрия в 0,1н растворе щелочи): 20 г
безводного карбоната натрия растворяют в 1 л 0,1н раствора щелочи;
         реактив В: 1%-ный раствор сульфата меди (Cu SO4·5H2O);
         реактив Д: 2%-ный раствор цитрата натрия;



                                                                                    65

Страницы