Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 67 стр.

UptoLike

Рубрика: 

67
фосфорной кислоты (6 моль/л). Затем в пробирки добавляют 2 мл ледя-
ной уксусной кислоты. После тщательного перемешивания содержимо-
го пробирки ставят на 1 ч в кипящую водяную баню.
4. После этого пробирки охлаждают под холодной водой или в
ледяной бане. Далее в каждую пробирку добавляют 4 мл толуола,
взбалтывают 20-30 с и дают отстояться. Через 10-15 мин верхний слой
толуола, в который переходит весь краситель, отделяют от водной фазы.
Окрашивание может быть от слаборозового до пурпурного в зависимо-
сти от содержания пролина.
5. Интенсивность окраски измеряют на ФЭКе при =520 нм
против толуола. Концентрацию пролина определяют по калибровочной
кривой, для построения которой готовят водные растворы пролина раз-
ных концентраций (от 0,0125 до 0,15 мг в 2 мл раствора). Результаты
расчета выражают с мг% на сухое вещество, предварительно определив,
сколько сухого вещества содержится в 1 г сырых листьев в контроле и
при недостатке воды.
6. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 24.
Таблица 24
Определение содержания пролина
Вари-
анты
опыта
колб
Масса
навески, г
Показания
прибора
Содержа-
ние про-
лина по
калибро-
вочной
кривой
Содержание белка
мг/г сухой
массы
6.2. Методы определения активности ферментов
Ферментами называются коллоидные органические соедине-
ния, которые образуются в животных и растительных организмах и яв-
ляются катализаторами протекающих в них биохимических процессов.
По своей химической природе ферменты принадлежат к белковым ве-
ществам. Физические и химические свойства ферментов обусловлены
их белковой природой: они термолабильны, способны высаливаться, и
дают характерные для белка качественные реакции.
Активность фермента очень сильно зависит от pH среды, присут-
ствия электролитов и других веществ, активирующих или наоборот инги-
бирующих их действие. Различные загрязнения окружающей среды вызы-
вают изменения ферментативной деятельности. Под влиянием кислых га-
зов даже при невидимых повреждениях листьев происходит изменение ак-
фосфорной кислоты (6 моль/л). Затем в пробирки добавляют 2 мл ледя-
ной уксусной кислоты. После тщательного перемешивания содержимо-
го пробирки ставят на 1 ч в кипящую водяную баню.
         4. После этого пробирки охлаждают под холодной водой или в
ледяной бане. Далее в каждую пробирку добавляют 4 мл толуола,
взбалтывают 20-30 с и дают отстояться. Через 10-15 мин верхний слой
толуола, в который переходит весь краситель, отделяют от водной фазы.
Окрашивание может быть от слаборозового до пурпурного в зависимо-
сти от содержания пролина.
         5. Интенсивность окраски измеряют на ФЭКе при =520 нм
против толуола. Концентрацию пролина определяют по калибровочной
кривой, для построения которой готовят водные растворы пролина раз-
ных концентраций (от 0,0125 до 0,15 мг в 2 мл раствора). Результаты
расчета выражают с мг% на сухое вещество, предварительно определив,
сколько сухого вещества содержится в 1 г сырых листьев в контроле и
при недостатке воды.
         6. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 24.
                                                                  Таблица 24
                  Определение содержания пролина
Вари-     №        Масса      Показания   Содержа-     Содержание белка
 анты    колб    навески, г    прибора    ние про-
опыта                                     лина по    мг/г сухой       мг/%
                                          калибро-    массы
                                           вочной
                                           кривой



                6.2. Методы определения активности ферментов

        Ферментами называются коллоидные органические соедине-
ния, которые образуются в животных и растительных организмах и яв-
ляются катализаторами протекающих в них биохимических процессов.
По своей химической природе ферменты принадлежат к белковым ве-
ществам. Физические и химические свойства ферментов обусловлены
их белковой природой: они термолабильны, способны высаливаться, и
дают характерные для белка качественные реакции.
        Активность фермента очень сильно зависит от pH среды, присут-
ствия электролитов и других веществ, активирующих или наоборот инги-
бирующих их действие. Различные загрязнения окружающей среды вызы-
вают изменения ферментативной деятельности. Под влиянием кислых га-
зов даже при невидимых повреждениях листьев происходит изменение ак-

                                                                          67