Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 68 стр.

UptoLike

Рубрика: 

68
тивности ферментов в клетках вследствие подкисления и нарушения ион-
ного режима, метаболизма и накопления балластных и, возможно, токсиче-
ских продуктов. Нарушения ферментативных систем более значительны у
неустойчивых видов, чем у устойчивых (Николаевский, 1979).
6.2.1. Определение активности пероксидазы (I.II.I.7)
Пероксидаза двухкомпонентный фермент класса оксидоредуктаз,
состоящий из гематина (низкомолекулярного кофермента, содержащего же-
лезо) и апоферментаелковой частицы, составляющей основную часть фер-
мента) (Уильямс, 1975). В настоящее время известно, что пероксидаза вы-
полняет две функции: пероксидазную и оксидазную.
Выполняя пероксидазную функцию, этот фермент катализирует
реакции окисления различных субстратов определенной химической
природы, перекись выполняет роль акцептора электронов:
H
2
O
2
H
2
O+O убин, 1976). К субстратам, окисленным пероксидазой в
присутствии перекиси, могут быть отнесены следующие соединения:
практически все фенолы (пирокатехин, пирогаллол, галловая кислота,
гваякол и др.); ароматические амины ланин, бензидин, парафенилои-
диамин, белирубин и др.); йодистый водород, легкоокисляемые веще-
ства типа аскорбиновой кислоты, нитритов и других.
Метод основан на из-
мерении времени, за которое
опытный раствор достигает
определенную оптическую
плотность. В качестве субстрата
используется бензидин, в ре-
зультате окисления которого
образуется соединение синего
цвета.
Реактивы и оборудование: бензидин; перекись водорода; пипетки; колбы на
25 мл (5 шт.); электронные весы; фарфоровые ступки, пестики; секундомер; ФЭК.
Ход работы:
1. Готовят раствор бензидина, для этого в мерную колбу на 200 мл,
наполненную на 2/3 дистиллированной водой, прибавляют 2-3 мл ледяной
уксусной кислоты и 184 мг бензидина. Колбу нагревают на водяной бане до
6С при постоянном взбалтывании. После растворения бензидина в колбу
добавляют 5,45 г уксуснокислого натрия. После его растворения колбу охла-
ждают и доливают водой до метки.
тивности ферментов в клетках вследствие подкисления и нарушения ион-
ного режима, метаболизма и накопления балластных и, возможно, токсиче-
ских продуктов. Нарушения ферментативных систем более значительны у
неустойчивых видов, чем у устойчивых (Николаевский, 1979).

                  6.2.1. Определение активности пероксидазы (I.II.I.7)

         Пероксидаза – двухкомпонентный фермент класса оксидоредуктаз,
состоящий из гематина (низкомолекулярного кофермента, содержащего же-
лезо) и апофермента (белковой частицы, составляющей основную часть фер-
мента) (Уильямс, 1975). В настоящее время известно, что пероксидаза вы-
полняет две функции: пероксидазную и оксидазную.
         Выполняя пероксидазную функцию, этот фермент катализирует
реакции окисления различных субстратов определенной химической
природы, перекись выполняет роль акцептора электронов:
H2O2 H2O+O (Рубин, 1976). К субстратам, окисленным пероксидазой в
присутствии перекиси, могут быть отнесены следующие соединения:
практически все фенолы (пирокатехин, пирогаллол, галловая кислота,
гваякол и др.); ароматические амины (аланин, бензидин, парафенилои-
диамин, белирубин и др.); йодистый водород, легкоокисляемые веще-
ства типа аскорбиновой кислоты, нитритов и других.
         Метод основан на из-
мерении времени, за которое
опытный раствор достигает
определенную         оптическую
плотность. В качестве субстрата
используется бензидин, в ре-
зультате окисления которого
образуется соединение синего
цвета.

          Реактивы и оборудование: бензидин; перекись водорода; пипетки; колбы на
25 мл (5 шт.); электронные весы; фарфоровые ступки, пестики; секундомер; ФЭК.

         Ход работы:
        1. Готовят раствор бензидина, для этого в мерную колбу на 200 мл,
наполненную на 2/3 дистиллированной водой, прибавляют 2-3 мл ледяной
уксусной кислоты и 184 мг бензидина. Колбу нагревают на водяной бане до
60°С при постоянном взбалтывании. После растворения бензидина в колбу
добавляют 5,45 г уксуснокислого натрия. После его растворения колбу охла-
ждают и доливают водой до метки.

68