Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 71 стр.

UptoLike

Рубрика: 

71
3. Обе кюветы ставят в ФЭК, уравнивают световые потоки
(стрелка прибора стоит на нуле). Определение проводят при желто-
зеленом светофильтре (λ=560 нм).
4. В левую контрольную кювету вносят 2 мл воды, в правую
опытную кювету 2 мл раствора пирокатехина. Одновременно с влива-
нием пирокатехина включают секундомер и отмечают время, когда
стрелка гальванометра достигнет нулевого положения. Рекомендуется
брать такие разведения вытяжки, при которых время изменения окраски
не превышало 30-60 секунд.
5. Активность фермента рассчитывают по формуле:
dt
Д
,
где Д оптическая плотность;
Е разведение (перерасчет на 1 г сырой массы);
t время, с;
d толщина слоя жидкости, толщина кюветы, см.
Активность полифенолоксидазы выражают в единицах оптиче-
ской плотности на грамм сырой массы в секунду (∆Д
560
г
-1
·с
-1
).
6. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 26.
Таблица 26
Определение активности полифенолоксидазы
Объект
Навеска, г
Объем
экстракта,
мл
Разведение
вытяжки в
реакционной
смеси
Время
изменения
окраски
раствора, с
Активность
фермента
6.2.3. Определение активности каталазы (I.II.I.6)
Каталаза - это двухкомпонентный фермент, состоящий из белка и
соединенной с ним простетической группы. Кристаллическая каталаза со-
держит 0,09% железа, что соответствует четырем его атомам на молекулу.
Каталаза всегда присутствует в системах, где происходят про-
цессы клеточного дыхания с участием флавиновых дегидрогеназ, в ре-
зультате деятельности которых образуется токсичная для клетки пере-
кись водорода. Поэтому каталаза выполняет важную роль, разлагая ток-
сичную для клеток перекись водорода. Кроме того, весьма существен-
ной должна быть признана роль каталазы в снабжении молекулярным
кислородом тех участков ткани, куда доступ его в силу тех или иных
причин затруднен. Например, ткани перикарпия сочных плодов, много-
        3. Обе кюветы ставят в ФЭК, уравнивают световые потоки
(стрелка прибора стоит на нуле). Определение проводят при желто-
зеленом светофильтре (λ=560 нм).
        4. В левую контрольную кювету вносят 2 мл воды, в правую
опытную кювету – 2 мл раствора пирокатехина. Одновременно с влива-
нием пирокатехина включают секундомер и отмечают время, когда
стрелка гальванометра достигнет нулевого положения. Рекомендуется
брать такие разведения вытяжки, при которых время изменения окраски
не превышало 30-60 секунд.
        5. Активность фермента рассчитывают по формуле:      Д    ,
                                                                   t d
где Д – оптическая плотность;
    Е – разведение (перерасчет на 1 г сырой массы);
    t – время, с;
    d – толщина слоя жидкости, толщина кюветы, см.
         Активность полифенолоксидазы выражают в единицах оптиче-
ской плотности на грамм сырой массы в секунду (∆Д560г-1·с-1).
         6. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 26.

                                                               Таблица 26
            Определение активности полифенолоксидазы
Объект   Навеска, г     Объем       Разведение     Время       Активность
                      экстракта,    вытяжки в    изменения      фермента
                          мл       реакционной    окраски
                                      смеси      раствора, с




                  6.2.3. Определение активности каталазы (I.II.I.6)

        Каталаза - это двухкомпонентный фермент, состоящий из белка и
соединенной с ним простетической группы. Кристаллическая каталаза со-
держит 0,09% железа, что соответствует четырем его атомам на молекулу.
        Каталаза всегда присутствует в системах, где происходят про-
цессы клеточного дыхания с участием флавиновых дегидрогеназ, в ре-
зультате деятельности которых образуется токсичная для клетки пере-
кись водорода. Поэтому каталаза выполняет важную роль, разлагая ток-
сичную для клеток перекись водорода. Кроме того, весьма существен-
ной должна быть признана роль каталазы в снабжении молекулярным
кислородом тех участков ткани, куда доступ его в силу тех или иных
причин затруднен. Например, ткани перикарпия сочных плодов, много-

                                                                         71