Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 73 стр.

         Пример расчета разведения. Навеску ткани 0,20 г перенесли в колбу на 50
мл. Непосредственно для определения каталазы было взято 5 мл вытяжки. Получает-
ся разбавление равное 50:5=10 или 200 мг:10=20 мг навески. Данная вытяжка имела
определенную каталазную активность «а», тогда составляют пропорцию:
                        20 мг – а                         1000 а
               1000 мг (1 г) – х                     Х               50 а
                                                                      20
          Т.о. в формулу вместо Е ставится разбавление 50.
          6. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 27.
                                                            Таблица 27
                    Определение активности каталазы
    Варианты        № колб      Навеска, взя-       Показания       Активность каталазы,
     опыта                      тая для опыта        прибора           мл О2·г-1·мин-1




 6.2.3.2. Газометрический метод определения активности каталазы
          Реактивы и оборудование: перекись водорода; каталазник; бюретка; ступки;
пестики; колбы на 25 мл (5 шт.); пипетки; секундомер.
          Ход работы:
         1. Навеску растительного материала (0,5 г) растирают в ступке с
водой с добавлением 0,2 г мела (для создания щелочной реакции) и не-
большим количеством песка, переносят в мерную колбу на 25 мл и до-
водят дистиллированной водой до метки.
         2. Полученную смесь (10 мл) вносят в одно колено каталазника,
а в другое колено вносят 5 мл 3%-го раствора перекиси водорода.
         3. Соединяют каталазник с резиновой трубкой, не допуская
смешивания жидкостей, установив уровень воды в бюретке на нуле.
         4. Быстрым изменением положения каталазника смешивают
жидкости в обоих коленах. Включают секундомер и отмечают время
начала опыта. По понижению уровня воды в бюретке определяют объем
кислорода (в мл), выделенного в течение 3-5 мин.
         5. Активность каталазы рассчитывают по формуле:         a   ,

где а – количество O2, выделившегося в результате работы фермента, мл;
    Е – разведение (перерасчет на 1 г сырой массы);
    Т – время (3-5 мин).
           Пример расчета разведения: 0,5 г навески→25 мл→10 мл (Е=2,5), что соответ-
ствует 0,5:2,5=0,2 г навески, а 1 г навески проявит активность (1:0,2=5) в 5 раз больше, зна-
чит в формулу вместо Е ставим 5.
          6. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 28.


                                                                                         73