Большой практикум по биоэкологии. Ч. 1. Воскресенская О.Л - 75 стр.

UptoLike

Рубрика: 

75
5. Момент приливания раствора аскорбиновой кислоты отмечают
по секундомеру (отсчет снимается через 30 с, 1 мин, в течение 10 мин).
6. Падение оптической плотности линейно во времени. Результаты
выражают в единицах падения оптической плотности за 10 мин на единицу
веса или площади листа по формуле:
Vn
nVdД
11
,
где А активность фермента;
Д величина падения оптической плотности;
d разведение в колбе;
n количество листьев в пробе;
n
1
. количество дисков;
V объем фильтрата в кювете;
V
1
общий объем жидкости в кювете.
7. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 29.
Таблица 29
Определение активности аскорбатоксидазы
Объект
Навеска,
г
Количество
дисков, шт.
Разведение
вытяжки
в реакцион-
ной смеси
Объем
фильтрата,
мл
Показания
прибора
6.2.5. Определение активности АТФ-азы
АТФ-азы растительных тканей состоит из нескольких фермен-
тативных систем, биологическая роль которых еще недостаточно полно
изучена. АТФ-азы освобождают энергию пирофосфатной связи при
гидролизе АТФ: АТФ+ H
2
O→АДФ+Ф
н
.
В связи с этим АТФ-азам принадлежит большая роль на заклю-
чительном этапе энергетического обмена клетки. В митохондриях обна-
ружено несколько АТФ-аз, активируемых двухвалентными катионами
(Са
+2
, Mg
+2
) и различающихся по характеру зависимости от pH среды.
Высказывается предположение, что эти различия АТФ-азы соответ-
ствуют трем пунктам сопряжения в дыхательной цепи (Плешков,1968;
Починок, 1976).
Реактивы и оборудование: сульфат магния; АТФ; трихлоруксусная кислота;
соляная кислота; трис (оксиметиламинометан); молибдат аммония; сурьмяновокис-
лый калий; серная кислота; аскорбиновая кислота; перекристаллизованный КН
2
РО
4
;
колбы на 1 л и 2 л; пробирки; термостат; холодильник; ФЭК.
           5. Момент приливания раствора аскорбиновой кислоты отмечают
по секундомеру (отсчет снимается через 30 с, 1 мин, в течение 10 мин).
          6. Падение оптической плотности линейно во времени. Результаты
выражают в единицах падения оптической плотности за 10 мин на единицу
веса или площади листа по формуле:        Д d V1 n1 ,
                                            n V
где А – активность фермента;
     ∆Д – величина падения оптической плотности;
     d – разведение в колбе;
     n – количество листьев в пробе;
     n1 .– количество дисков;
     V – объем фильтрата в кювете;
     V1 – общий объем жидкости в кювете.
           7. Результаты измерений и расчетов записывают в таблицу 29.
                                                     Таблица 29
              Определение активности аскорбатоксидазы
Объект   Навеска,   Количество    Разведение      Объем       Показания   Активность
            г       дисков, шт.    вытяжки      фильтрата,     прибора     фермента,
                                  в реакцион-      мл                     ∆Д279г-1·мин-1
                                   ной смеси



                      6.2.5. Определение активности АТФ-азы

        АТФ-азы растительных тканей состоит из нескольких фермен-
тативных систем, биологическая роль которых еще недостаточно полно
изучена. АТФ-азы освобождают энергию пирофосфатной связи при
гидролизе АТФ: АТФ+ H2O→АДФ+Фн.
        В связи с этим АТФ-азам принадлежит большая роль на заклю-
чительном этапе энергетического обмена клетки. В митохондриях обна-
ружено несколько АТФ-аз, активируемых двухвалентными катионами
(Са+2, Mg+2) и различающихся по характеру зависимости от pH среды.
Высказывается предположение, что эти различия АТФ-азы соответ-
ствуют трем пунктам сопряжения в дыхательной цепи (Плешков,1968;
Починок, 1976).

         Реактивы и оборудование: сульфат магния; АТФ; трихлоруксусная кислота;
соляная кислота; трис (оксиметиламинометан); молибдат аммония; сурьмяновокис-
лый калий; серная кислота; аскорбиновая кислота; перекристаллизованный КН2РО4;
колбы на 1 л и 2 л; пробирки; термостат; холодильник; ФЭК.


                                                                            75