Биохимия белков. Яковлева М.Н - 13 стр.

UptoLike

13
Необратимые реакции осаждения приводят к денатурации
белков, при этом разрушается пространственная структура
молекулы и белки утрачивают свои естественные биологические и
физико-химические свойства. Денатурацию белков можно вызвать
физическими воздействиями (кипячение, замораживание, высокое
давление, вибрация, радиоактивное излучение и др.) и
химическими осадителями.
Ход работы.
1. Осаждение белков неорганическими осадителями.
а) Осаждение белков минеральными кислотами.
В пробирку осторожно
наливают около 1 мл
концентрированной азотной кислоты. Затем, наклонив пробирку,
медленно по стенке добавляют 1 мл 1% раствора белка. На границе
двух жидкостей появляется осадок в виде белого кольца.
Такую же реакцию проделывают с концентрированной
соляной и серной кислотами.
б) Осаждение белков солями тяжелых металлов.
В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка
и
добавляют по 3-4 капли: в первую пробирку - 7% раствора
сульфата меди, во вторую - 5% раствора ацетата свинца, в третью -
5% раствора серебра. Во всех пробирках образуется осадок.
2. Осаждение белков органическими осадителями.
а) осаждение белков органическими кислотами.
В 2 пробирки наливают по 2 мл 1% раствора белка и
добавляют в одну пробирку 4-5 капель 10% раствора
сульфосалициловой кислоты, в другую - 5-10 капель 10%
трихлоруксусной кислоты. Выпадает осадок белка.
б) Осаждение белков органическими растворителями.
К 1 мл 1% раствора белка добавляют 2 мл органического
растворителя (96% этанола, хлороформа, ацетона или эфира) и
перемешивают. Образование
осадка можно усилить добавлением
нескольких капель насыщенного раствора хлорида натрия.
в) Осаждение белков реактивами на алкалоиды.
В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка, по 4-5
капель 1% раствора уксусной кислоты и по 2-3 капли: в первую
пробирку - 10% раствора пикриновой кислоты, во вторую -
насыщенного раствора танина, в третью - 5% раствора железисто-
синеродистого калия. Наблюдают выпадение
осадка.
     Необратимые реакции осаждения приводят к денатурации
белков, при этом разрушается пространственная структура
молекулы и белки утрачивают свои естественные биологические и
физико-химические свойства. Денатурацию белков можно вызвать
физическими воздействиями (кипячение, замораживание, высокое
давление, вибрация, радиоактивное излучение и др.) и
химическими осадителями.
    Ход работы.
    1. Осаждение белков неорганическими осадителями.
    а) Осаждение белков минеральными кислотами.
    В    пробирку    осторожно     наливают     около   1    мл
концентрированной азотной кислоты. Затем, наклонив пробирку,
медленно по стенке добавляют 1 мл 1% раствора белка. На границе
двух жидкостей появляется осадок в виде белого кольца.
    Такую же реакцию проделывают с концентрированной
соляной и серной кислотами.

    б) Осаждение белков солями тяжелых металлов.
    В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка и
добавляют по 3-4 капли: в первую пробирку - 7% раствора
сульфата меди, во вторую - 5% раствора ацетата свинца, в третью -
5% раствора серебра. Во всех пробирках образуется осадок.
    2. Осаждение белков органическими осадителями.
    а) осаждение белков органическими кислотами.
    В 2 пробирки наливают по 2 мл 1% раствора белка и
добавляют в одну пробирку 4-5 капель 10% раствора
сульфосалициловой кислоты, в другую - 5-10 капель 10%
трихлоруксусной кислоты. Выпадает осадок белка.
    б) Осаждение белков органическими растворителями.
    К 1 мл 1% раствора белка добавляют 2 мл органического
растворителя (96% этанола, хлороформа, ацетона или эфира) и
перемешивают. Образование осадка можно усилить добавлением
нескольких капель насыщенного раствора хлорида натрия.
    в) Осаждение белков реактивами на алкалоиды.
    В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка, по 4-5
капель 1% раствора уксусной кислоты и по 2-3 капли: в первую
пробирку - 10% раствора пикриновой кислоты, во вторую -
насыщенного раствора танина, в третью - 5% раствора железисто-
синеродистого калия. Наблюдают выпадение осадка.
                                                             13