Составители:
Рубрика:
13
Необратимые реакции осаждения приводят к денатурации
белков, при этом разрушается пространственная структура
молекулы и белки утрачивают свои естественные биологические и
физико-химические свойства. Денатурацию белков можно вызвать
физическими воздействиями (кипячение, замораживание, высокое
давление, вибрация, радиоактивное излучение и др.) и
химическими осадителями.
Ход работы.
1. Осаждение белков неорганическими осадителями.
а) Осаждение белков минеральными кислотами.
В пробирку осторожно
наливают около 1 мл
концентрированной азотной кислоты. Затем, наклонив пробирку,
медленно по стенке добавляют 1 мл 1% раствора белка. На границе
двух жидкостей появляется осадок в виде белого кольца.
Такую же реакцию проделывают с концентрированной
соляной и серной кислотами.
б) Осаждение белков солями тяжелых металлов.
В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка
и
добавляют по 3-4 капли: в первую пробирку - 7% раствора
сульфата меди, во вторую - 5% раствора ацетата свинца, в третью -
5% раствора серебра. Во всех пробирках образуется осадок.
2. Осаждение белков органическими осадителями.
а) осаждение белков органическими кислотами.
В 2 пробирки наливают по 2 мл 1% раствора белка и
добавляют в одну пробирку 4-5 капель 10% раствора
сульфосалициловой кислоты, в другую - 5-10 капель 10%
трихлоруксусной кислоты. Выпадает осадок белка.
б) Осаждение белков органическими растворителями.
К 1 мл 1% раствора белка добавляют 2 мл органического
растворителя (96% этанола, хлороформа, ацетона или эфира) и
перемешивают. Образование
осадка можно усилить добавлением
нескольких капель насыщенного раствора хлорида натрия.
в) Осаждение белков реактивами на алкалоиды.
В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка, по 4-5
капель 1% раствора уксусной кислоты и по 2-3 капли: в первую
пробирку - 10% раствора пикриновой кислоты, во вторую -
насыщенного раствора танина, в третью - 5% раствора железисто-
синеродистого калия. Наблюдают выпадение
осадка.
Необратимые реакции осаждения приводят к денатурации белков, при этом разрушается пространственная структура молекулы и белки утрачивают свои естественные биологические и физико-химические свойства. Денатурацию белков можно вызвать физическими воздействиями (кипячение, замораживание, высокое давление, вибрация, радиоактивное излучение и др.) и химическими осадителями. Ход работы. 1. Осаждение белков неорганическими осадителями. а) Осаждение белков минеральными кислотами. В пробирку осторожно наливают около 1 мл концентрированной азотной кислоты. Затем, наклонив пробирку, медленно по стенке добавляют 1 мл 1% раствора белка. На границе двух жидкостей появляется осадок в виде белого кольца. Такую же реакцию проделывают с концентрированной соляной и серной кислотами. б) Осаждение белков солями тяжелых металлов. В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка и добавляют по 3-4 капли: в первую пробирку - 7% раствора сульфата меди, во вторую - 5% раствора ацетата свинца, в третью - 5% раствора серебра. Во всех пробирках образуется осадок. 2. Осаждение белков органическими осадителями. а) осаждение белков органическими кислотами. В 2 пробирки наливают по 2 мл 1% раствора белка и добавляют в одну пробирку 4-5 капель 10% раствора сульфосалициловой кислоты, в другую - 5-10 капель 10% трихлоруксусной кислоты. Выпадает осадок белка. б) Осаждение белков органическими растворителями. К 1 мл 1% раствора белка добавляют 2 мл органического растворителя (96% этанола, хлороформа, ацетона или эфира) и перемешивают. Образование осадка можно усилить добавлением нескольких капель насыщенного раствора хлорида натрия. в) Осаждение белков реактивами на алкалоиды. В три пробирки наливают по 1 мл 1% раствора белка, по 4-5 капель 1% раствора уксусной кислоты и по 2-3 капли: в первую пробирку - 10% раствора пикриновой кислоты, во вторую - насыщенного раствора танина, в третью - 5% раствора железисто- синеродистого калия. Наблюдают выпадение осадка. 13
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 11
- 12
- 13
- 14
- 15
- …
- следующая ›
- последняя »