Составители:
Рубрика:
15
Фракционное осаждение белков плазмы крови
сульфатом аммония.
Фибриноген выпадает в осадок при 33% насыщении плазмы
сернокислым аммонием, глобулины - при полунасыщении а
альбумины - при полном насыщении.
Ход работы.
1. К 2 мл плазмы крови добавляют 5 мл дистиллированной
воды, 3,5 мл насыщенного раствора сульфата аммония и
перемешивают. В осадок выпадает фибриноген (можно наблюдать
лишь незначительное помутнение), который отделяют
фильтрованием. Наличие белка на фильтре проверяют биуретовой
реакцией: для этого воронку с фильтром переносят в чистую
пробирку и на фильтр наливают 1 мл 10% раствора гидроксида
натрия и 1 каплю 1% раствора сульфата меди. Фильтрат (№1)
используют для дальнейшей работы.
2. К 4 мл фильтрата №1 добавляют 4 мл насыщенного
раствора сульфата аммония и перемешивают. В осадок выпадают
глобулины, которые отделяют фильтрованием. Получают осадок, с
которым проделывают биуретовую реакцию, и фильтрат №2.
3. К фильтрату №2 добавляют при постоянном пере-
мешивании
стеклянной палочкой кристаллический сульфат
аммония до насыщения (пока соль не перестанет растворяться).
Выпадают в осадок альбумины, наличие которых проверяют
биуретовой реакцией: 1 мл смеси переносят в чистую пробирку,
добавляют 1 мл 10% раствора гидроксида натрия и 1 каплю 1%
раствора сульфата меди.
Оформление работы
1. Записать результаты реакций необратимого осаждения
белка при действии неорганических и органических осадителей в
виде таблицы:
Название
групп
осадителей
Употребляемые
реактивы
Характер и
цвет осадка
Чем
обусловлена
реакция
2. Результаты опытов по осаждению белков при нагревании
оформить в виде таблицы:
Фракционное осаждение белков плазмы крови сульфатом аммония. Фибриноген выпадает в осадок при 33% насыщении плазмы сернокислым аммонием, глобулины - при полунасыщении а альбумины - при полном насыщении. Ход работы. 1. К 2 мл плазмы крови добавляют 5 мл дистиллированной воды, 3,5 мл насыщенного раствора сульфата аммония и перемешивают. В осадок выпадает фибриноген (можно наблюдать лишь незначительное помутнение), который отделяют фильтрованием. Наличие белка на фильтре проверяют биуретовой реакцией: для этого воронку с фильтром переносят в чистую пробирку и на фильтр наливают 1 мл 10% раствора гидроксида натрия и 1 каплю 1% раствора сульфата меди. Фильтрат (№1) используют для дальнейшей работы. 2. К 4 мл фильтрата №1 добавляют 4 мл насыщенного раствора сульфата аммония и перемешивают. В осадок выпадают глобулины, которые отделяют фильтрованием. Получают осадок, с которым проделывают биуретовую реакцию, и фильтрат №2. 3. К фильтрату №2 добавляют при постоянном пере- мешивании стеклянной палочкой кристаллический сульфат аммония до насыщения (пока соль не перестанет растворяться). Выпадают в осадок альбумины, наличие которых проверяют биуретовой реакцией: 1 мл смеси переносят в чистую пробирку, добавляют 1 мл 10% раствора гидроксида натрия и 1 каплю 1% раствора сульфата меди. Оформление работы 1. Записать результаты реакций необратимого осаждения белка при действии неорганических и органических осадителей в виде таблицы: Название Употребляемые Характер и Чем групп реактивы цвет осадка обусловлена осадителей реакция 2. Результаты опытов по осаждению белков при нагревании оформить в виде таблицы: 15
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 13
- 14
- 15
- 16
- 17
- …
- следующая ›
- последняя »