Составители:
Рубрика:
2
биохимической практике для изучения структуры и
аминокислотного состава белков, их количественного
определения.
1. БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ
(на обнаружение пептидных связей в белках)
Белки (пептиды) в щелочном растворе в присутствии солей
меди (II) образуют комплексные ее соединения, окрашенные в
сине-фиолетовый или красно-фиолетовый цвет.
Для пептидной (амидной) группы характерна лактам-
лактимная таутомерия:
В щелочной среде преобладающая лактимная (енольная)
форма полипептида взаимодействует с медью с образованием
стабильного окрашенного комплекса:
Ход работы
. К 1 мл 1% раствора белка (желатина, яичного
белка или сывороточного альбумина) добавляют 1 мл 10%
раствора щелочи (NaOH или KOH) и 1 каплю 1% раствора
сульфата меди. Появляется сине-фиолетовое или красно-
фиолетовое окрашивание.
2. НИНГИДРИНОВАЯ РЕАКЦИЯ
(на аминогруппу, находящуюся в α-положении)
Белки, полипептиды и свободные α-аминокислоты при
нагревании реагируют с нингидрином (трикетогидринденгид-
ратом) с
образованием продукта конденсации, окрашенного в
фиолетовый цвет:
Ход работы
. К 1 мл 1% раствора белка прибавляют 0,5 мл 0,5%
раствора нингидрина и нагревают до кипения. Появляется
фиолетово-синее окрашивание.
Проделывают эту реакцию с раствором аминокислоты, взяв
вместо раствора белка 1% раствор глицина. Сравнить полученные
результаты и сделать вывод.
3. РЕАКЦИЯ САКАГУЧИ (на аргинин)
Белки, содержащие аргинин, в присутствии щелочи дают
красное окрашивание с гипобромитом
и α-нафтолом.
Гуанидиновая группа аргинина окисляется гипобромитом, и
биохимической практике для изучения структуры и
аминокислотного состава белков, их количественного
определения.
1. БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ
(на обнаружение пептидных связей в белках)
Белки (пептиды) в щелочном растворе в присутствии солей
меди (II) образуют комплексные ее соединения, окрашенные в
сине-фиолетовый или красно-фиолетовый цвет.
Для пептидной (амидной) группы характерна лактам-
лактимная таутомерия:
В щелочной среде преобладающая лактимная (енольная)
форма полипептида взаимодействует с медью с образованием
стабильного окрашенного комплекса:
Ход работы. К 1 мл 1% раствора белка (желатина, яичного
белка или сывороточного альбумина) добавляют 1 мл 10%
раствора щелочи (NaOH или KOH) и 1 каплю 1% раствора
сульфата меди. Появляется сине-фиолетовое или красно-
фиолетовое окрашивание.
2. НИНГИДРИНОВАЯ РЕАКЦИЯ
(на аминогруппу, находящуюся в α-положении)
Белки, полипептиды и свободные α-аминокислоты при
нагревании реагируют с нингидрином (трикетогидринденгид-
ратом) с образованием продукта конденсации, окрашенного в
фиолетовый цвет:
Ход работы. К 1 мл 1% раствора белка прибавляют 0,5 мл 0,5%
раствора нингидрина и нагревают до кипения. Появляется
фиолетово-синее окрашивание.
Проделывают эту реакцию с раствором аминокислоты, взяв
вместо раствора белка 1% раствор глицина. Сравнить полученные
результаты и сделать вывод.
3. РЕАКЦИЯ САКАГУЧИ (на аргинин)
Белки, содержащие аргинин, в присутствии щелочи дают
красное окрашивание с гипобромитом и α-нафтолом.
Гуанидиновая группа аргинина окисляется гипобромитом, и
2
