ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
Занятие 1
Объектами для обработки является суспензия нескольких видов микроорганизмов: бактерий, дрожжей,
спор микомицетов. Она подвергается воздействию термообработкой, облучением УФ – лучами и воздействию
уксусной кислоты.
Для изучения влияния величины температуры на гибель микроорганизмов три пробирки с 10 мл исход-
ной суспензии помещают поочередно на 15 мин в автоклав и стерилизуют, соответственно, при 0,5 атм (112
°С), при 1 атм (121 °С) и при 1,5 атм (127 °С). После стерилизации с соблюдением условий асептики стериль-
ной пипеткой на 1 мл по одной капле обработанной суспензии вносят на поверхность агаризованной среды СА
и МПА в чашки Петри и шпателем распределяют по поверхности. Чашки подписывают, переворачивают и по-
мещают в термостат на 1–2 суток при 37 °С.
Следует определить количество клеток в исходной суспензии. Для этого из пробирки с исходной взвесью
берется 1 мл и вносится в пробирку с 9 мл стерильной воды, затем 1 мл разведенной взвеси разбавляется в 100
и 1000 раз. Из этих пробирок по 1 капле вносят взвесь на чашки Петри с СА и МПА, растирают шпателем, под-
писывают и отправляют в термостат.
Для изучения кинетики гибели клеток одну пробирку с исходной суспензией, помещают в кипящую во-
дяную баню и через каждые 15 мин в течение часа отбирают стерильной пипеткой (всякий раз новый) каплю
суспензии и вносят на агаризованные пластинки с СА и МПА в чашки Петри. Растирают каплю шпателем по
поверхности среды. Чашки подписывают, переворачивают и помещают в термостат.
Для изучения влияния дозы облучения из пробиркок с исходными суспензиями микроорганизмами, сте-
рильной пипеткой на поверхности четырех чашек с МПА и четырех чашек с СА вносят с соблюдением правил
асептики по одной капле суспензии. Распределяют шпателем их по поверхности.
Устанавливают восемь чашек под бактерицидной лампой на расстояние 40 см. Через 10 мин вынимают
первые две чашки, последующие попарно с интервалом 10 мин. Подписывают, переворачивают и устанавлива-
ют чашки Петри в термостат.
Для изучения влияния концентрации органических кислот на микроорганизмы используют четыре
пробирки с исходной суспензией , в каждую из которых вносят ледяную уксусную кислоту по схеме (табл. 1).
1. Схема внесения реагента
Номер пробирки 1 2 3 4
Объем суспензии, мл 10 10 10 10
Количество ледяной уксусной кислоты, мл
0,01 0,02 0,03 0,04
Аккуратно взбалтывают содержимое пробирок и оставляют в покое на 15 мин. Затем из каждой пробирки
стерильными пипетками отбирают по одной капле обработанной суспензии и наносят на aгаризованную среду
СА и МПА. Распределяют каплю по всей поверхности пластинки среды шпателем. Чашки подписывают, пере-
ворачивают и помещают в термостат.
Занятие 2
Результаты воздействия стерилизующих факторов оценивают числу колоний на поверхности агаризован-
ной среды, путем прямого подсчета. Для облегчения подсчета пластинку со стороны дна чашки делят на секто-
ры и считают колоний по секторам. Полученные данные заносят в таблицы (табл. 2).
2. Результаты учета количества жизнеспособных организмов
после обработки исходной суспензии
методом _______________________ при условиях ______
(наименование метода стерилизации)
Бактерии Дрожжи Микомицеты
Питательная
среда
число ко-
лоний, шт
титр кле-
ток, кл/мл
число ко-
лоний, шт
титр кле-
ток, кл/мл
число ко-
лоний, шт
титр кле-
ток, кл/мл
Сусло-агар
Мясопеп-
тонный
агар
Для наглядности, следует выполнить диаграммы с использованием цветных фломастеров (рис. 4).
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 7
- 8
- 9
- 10
- 11
- …
- следующая ›
- последняя »
