Методы анализа биологически активных веществ. Анцупова Т.П - 13 стр.

рые под влиянием кислот еще более уплотняются и образуют не-     вато-фиолетового окрашивания, переходящего в темно-
растворимые аморфные соединения.                                 фиолетовое с дальнейшим выпадением темно-фиолетового осад-
        В зависимости от продуктов гидролиза различают галло-    ка.
вые и эллаговые дубильные вещества. В обоих этих группах не-             Качественное определение флавоноидов проводят обычно
фенольным компонентом бывает моносахарид, чаще глюкоза.          хроматографическим методом на бумаге или в тонком слое сили-
Эти группы еще называют галлотанины и эллаготанины. Обычно       кагеля, используя различную подвижность флавоноидов в разде-
в растениях присутствуют те и другие дубильные вещества.         лительных смесях. Чаще всего в качестве растворителя исполь-
        Дубильные вещества широко распространены в природе.      зуют смесь н-бутанол-уксусная кислота-вода в разных соотноше-
Они легко извлекаются водой и водно-спиртовыми смесями.          ниях. Хроматограммы просматривают в ультрафиолетовом свете,
Препараты дубильных веществ применяются в качестве вяжу-         при этом флавонолы имеют яркую зеленовато-желтую флуорес-
щих, противовоспалительных и антимикробных средств, а также      ценцию, флавоны и катехины проявляются на хроматограммах
как противоядие при отравлении алкалоидами, гликозидами и        после их обработки парами аммиака тоже в виде желтых пятен.
тяжелыми металлами. Полифенольные вещества неустановленно-               Танин – основной представитель дубильных веществ мо-
го строения, характерные для паразитного грибка, развивающего-   жет быть обнаружен, кроме реакции с хлорным железом, при
ся на стволах березы в виде наростов (чага) применяются в виде   действии на раствор танина разбавленной серной кислоты. При
симптоматического средства при злокачественных новообразова-     этом выпадает обильный осадок желтоватого цвета.
ниях.                                                                    Количественное определение фенольных соединений
        Природные дубильные вещества, за небольшими исклю-       проводят различными методами. При определении содержания
чениями, известны только в аморфном состоянии, плохо раство-     фенольных соединений с одним и двумя ароматическими коль-
римы в холодной воде, лучше – в горячей. Нерастворимы в орга-    цами трудность состоит в том, что предварительно необходимо
нических растворителях.                                          выявить основное вещество, входящее в состав суммы флавонои-
           Методы определения фенольных соединений               дов, и иметь стандартный образец этого вещества в качестве
        Фенольные соединения с одним и двумя ароматическими      сравнения. Так, в цветках боярышника определяют содержание
кольцами, а также дубильные вещества определяют при помощи       гиперозида, в цветках пижмы определяют сумму флавоноидов в
цветных реакций, главным образом, с раствором FeCl3. Реакция     пересчете на лютеолин и т.д. При этом определение проводят
проводится обычно в водной или спиртовой среде, если анализи-    обычно фотоколориметрическим или спектрофотометрическим
руемое вещество в воде не растворяется. Как уже было сказано,    методом в водно-спиртовых растворах с добавлением в качестве
при определении антрагликозидов, в зависимости от числа и рас-   реактива AlCl3. Часто предварительно флавоноиды вымывают с
положения фенольных гидроксилов окраска бывает разная, по-       помощью хроматографических колонок и только потом фотомет-
этому данные цветные реакции можно использовать для иденти-      рируют.
фикации отдельных групп фенольных соединений. Например,                  Используются и другие методы химического и физико-
группа гидролизуемых дубильных веществ образует с солями         химического анализа. Так, арбутин может быть определен титро-
окисного железа черно-синее окрашивание, а группа конденсиро-    ванием раствором йода с крахмалом после извлечения водой и
ванных дубильных веществ – черно-зеленое окрашивание. Фе-        осаждения примесей. Кумарины и фурокумарины можно опреде-
нольный гликозид арбутин (с одним ароматическим кольцом),        лить люминесцентным методом, принцип которого основан на
являющийся основным действующим началом листьев брусники         свойстве кумарина в присутствии водного раствора NaOH давать
и толокнянки, можно, например, обнаружить цветной реакцией с     зеленую флуоресценцию, интенсивность которой указывает на
сульфатом железа (II) в водном растворе по появлению красно-     концентрацию кумариновых соединений в растительном мате-

                             25                                                               26