Методы анализа биологически активных веществ. Анцупова Т.П - 5 стр.

UptoLike

Рубрика: 

9
слотой концентрированной и др.) и затем обрабатывают аммиа-
ком. При этом появляется малиновое окрашивание, обусловлен-
ное образованием аммониевой соли пурпурной (амалиновой) ки-
слоты.
N
N
O
O
R
R
N
N
R
1
2
N
N
O
O
OO
R
R
N
N
O
OO
R
OH
R
1
1
O
+
триалкилк- диалкилал- диалкилдиал-
сантин локсан луровая кислота
N
N
O
OO
R
R
N
N
O
OO
OH
R
R
N
N
O
O
R
R
O
O
N
N
O
O
R
R
H
4
NO
N
NH
4
OH
аммонийная соль тетраалкилпур-пуровой кислоты
Кроме осадочных и цветных реакций, для открытия и
идентификации алкалоидов пользуются и микрокристаллоскопи-
ческими реакциями с некоторыми реактивами (пикриновая ки-
слота, пикролоновая кислота, роданиды аммония и калия и др.).
Количественное определение алкалоидов
Прежде чем приступить к количественному анализу, не-
обходимо извлечь алкалоид из растительного сырья или из слож-
ной смеси и очистить его от балластных веществ. И все же чаще
определяют содержание не одного алкалоида, а их суммы. Мето-
ды количественного определения могут быть различными: весо-
вые, объемные, физико-химические.
Весовой (гравиметрический) метод заключается в том,
что определяют массу алкалоидов в виде оснований, выделенных
из солей после удаления растворителя. Для этого хлороформные
или эфирные извлечения алкалоидов фильтруют во взвешенную
10
колбу, растворитель отгоняют, остаток высушивают до постоян-
ной массы, охлаждают и взвешивают.
Из объемных (титриметрических) методов определения
алкалоидов наиболее распространенным является метод нейтра-
лизации. При этом можно титровать алкалоиды-основания и соли
алкалоидов. Чаще применяют первый случай. При прямом титро-
вании алкалоидыоснования, оставшиеся после отгона раство-
рителя (как в весовом анализе), титруют непосредственно кисло-
той с метиловым оранжевым до образования соли. Однако чаще
используется обратное титрование. При этом способе после от-
гонки растворителя к остатку алкалоидов-оснований прибавляют
избыток титрованного раствора кислоты. Основания алкалоидов
растворяются с образованием соответствующей соли, а избыток
кислоты оттитровывают раствором щелочи по фенолфталеину
или метиловому красному.
Количественное содержание алкалоидов можно опреде-
лять и титрованием по методу осаждения, используя различные
осаждающие реактивы (например, реактив МайераК
2
[НgJ
4
],
титрованный раствор йода и др.). При этом к раствору алкалоида
в нейтральной или кислой среде прибавляют, например, титро-
ванный раствор йода, который образует осадки с алкалоидами.
Избыток йода оттитровывают раствором тиосульфата натрия. Та-
ким методом определяют кофеин во всех медицинских препара-
тах, которые его содержат. Можно определять кофеин этим спо-
собом и в пищевых продуктах (чай, кофе), он предусмотрен
ГОСТом, но довольно сложен.
В настоящее время для определения алкалоидов широко
применяют физико-химические методы анализа и чаще всего фо-
тометрию. При этом используют цветные реакции, обусловлен-
ные характером различных функциональных групп алкалоидов.
Например, вместо титрования кофеина по методу йодометрии
ГОСТом предусмотрен также фотоколориметрический метод, так
как можно использовать цветную реакцию получения тетраме-
тилпурпуровой кислоты (мурексидную пробу). По интенсивности
окраски раствора определяют массовую долю кофеина в анализи-
руемом продукте.
Для количественного определения алкалоидов использу-
ется также титрование солей алкалоидов в неводных растворите-
слотой концентрированной и др.) и затем обрабатывают аммиа-                                                               колбу, растворитель отгоняют, остаток высушивают до постоян-
ком. При этом появляется малиновое окрашивание, обусловлен-                                                               ной массы, охлаждают и взвешивают.
ное образованием аммониевой соли пурпурной (амалиновой) ки-                                                                       Из объемных (титриметрических) методов определения
слоты.                                                                                                                    алкалоидов наиболее распространенным является метод нейтра-
                                                                                                                          лизации. При этом можно титровать алкалоиды-основания и соли
             O                                              O                                        O
                                                                                                                          алкалоидов. Чаще применяют первый случай. При прямом титро-
  R      N                 N       R2   O       R       N
                                                                             O
                                                                                         R   N
                                                                                                          OH
                                                                                                                          вании алкалоиды – основания, оставшиеся после отгона раство-
                                                                                     +                                    рителя (как в весовом анализе), титруют непосредственно кисло-
     O       N         N                        O           N                O           O           N    O               той с метиловым оранжевым до образования соли. Однако чаще
             R1                                                 R1                                   R1                   используется обратное титрование. При этом способе после от-
                                                                                                                          гонки растворителя к остатку алкалоидов-оснований прибавляют
 триалкилк-                                     диалкилал-                               диалкилдиал-                     избыток титрованного раствора кислоты. Основания алкалоидов
  сантин                                         локсан                                  луровая кислота                  растворяются с образованием соответствующей соли, а избыток
                                                                                                                          кислоты оттитровывают раствором щелочи по фенолфталеину
             O                          O                                        O                            O
                                                                                                                          или метиловому красному.
                  OH                                                                                                              Количественное содержание алкалоидов можно опреде-
 R       N                 O                N       R            R       N                       N                N   R   лять и титрованием по методу осаждения, используя различные
                                                        NH4OH
                                                                                                                          осаждающие реактивы (например, реактив Майера – К2[НgJ4],
 O           N     O           O        N       O                    O           N       O       H4NO         N       O   титрованный раствор йода и др.). При этом к раствору алкалоида
             R                          R                                        R                            R           в нейтральной или кислой среде прибавляют, например, титро-
                                                                                                                          ванный раствор йода, который образует осадки с алкалоидами.
        аммонийная соль тетраалкилпур-пуровой кислоты                                                                     Избыток йода оттитровывают раствором тиосульфата натрия. Та-
        Кроме осадочных и цветных реакций, для открытия и                                                                 ким методом определяют кофеин во всех медицинских препара-
идентификации алкалоидов пользуются и микрокристаллоскопи-                                                                тах, которые его содержат. Можно определять кофеин этим спо-
ческими реакциями с некоторыми реактивами (пикриновая ки-                                                                 собом и в пищевых продуктах (чай, кофе), он предусмотрен
слота, пикролоновая кислота, роданиды аммония и калия и др.).                                                             ГОСТом, но довольно сложен.
            Количественное определение алкалоидов                                                                                 В настоящее время для определения алкалоидов широко
        Прежде чем приступить к количественному анализу, не-                                                              применяют физико-химические методы анализа и чаще всего фо-
обходимо извлечь алкалоид из растительного сырья или из слож-                                                             тометрию. При этом используют цветные реакции, обусловлен-
ной смеси и очистить его от балластных веществ. И все же чаще                                                             ные характером различных функциональных групп алкалоидов.
определяют содержание не одного алкалоида, а их суммы. Мето-                                                              Например, вместо титрования кофеина по методу йодометрии
ды количественного определения могут быть различными: весо-                                                               ГОСТом предусмотрен также фотоколориметрический метод, так
вые, объемные, физико-химические.                                                                                         как можно использовать цветную реакцию получения тетраме-
        Весовой (гравиметрический) метод заключается в том,                                                               тилпурпуровой кислоты (мурексидную пробу). По интенсивности
что определяют массу алкалоидов в виде оснований, выделенных                                                              окраски раствора определяют массовую долю кофеина в анализи-
из солей после удаления растворителя. Для этого хлороформные                                                              руемом продукте.
или эфирные извлечения алкалоидов фильтруют во взвешенную                                                                         Для количественного определения алкалоидов использу-
                                                                                                                          ется также титрование солей алкалоидов в неводных растворите-

                                                            9                                                                                          10