Биохимия. Березовская В.А. - 16 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

КамчатГТУ | Петропавловск-Камчатский

Составители: 

Рубрика: 

Таблица 1
Приготовление буферных растворов
№
пробирки
Состав раствора, мл рН
раствора
Степень
помутнения
2М СН
3
СООН Н
2
О
1 1,6 0,4 3,8
2 0,8 1,2 4,1
3 0,4 1,6 4,4
4 0,2 1,8 4,7
5 0,1 1,9 5,0
6 0,06 1,94 5,3
4.2. Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка ме-
тодом высаливания.
Яичный белок состоит из нескольких белков, отличающихся
друг от друга по растворимости. При помощи метода высалива-
ния из него можно выделить альбумины и глобулины.
4.2.1. К 20 каплям неразбавленного яичного белка добавляют
сухую соль хлорида натрия до насыщения раствора, т. е. до того
момента, когда соль перестанет растворяться. Выпадает белый
аморфный осадок глобулинов. Через 10–12 мин произойдет их
полное осаждение. После этого осадок отфильтровывают через
бумажный фильтр. Пробирку с фильтратом кипятят или проводят
с ее содержимым биуретовую реакцию. Отрицательная реакция
указывает на отсутствие белка, положительная – на его присутст-
вие. Делают вывод о наличии белка в фильтрате.
4.2.2. К 20 каплям неразбавленного яичного белка добавляют
20 капель насыщенного раствора сульфата аммония и перемеши-
вают. Получается полунасыщенный раствор сульфата аммония,
в котором выпадает осадок яичного глобулина. Через 5–10 мин
осадок отфильтровывают. В фильтрате остается яичный альбу-
мин. Для его высаливания к фильтрату прибавляют сухую соль
сульфата аммония до полного насыщения раствора. Выпавший
осадок альбумина отфильтровывают, а фильтрат кипятят или
проводят с ним биуретовую реакцию. Отрицательная реакция
указывает на отсутствие белка. Делают вывод о высаливающей
способности хлорида натрия и сульфата аммония.
4.3. Осаждение белков при нагревании в разных средах.
Берут пять пробирок, наливают в каждую по 0,5 мл раствора
разбавленного яичного белка. Затем в первую пробирку добавля-
16
                                                       Таблица 1
                 Приготовление буферных растворов
    №          Состав раствора, мл          рН        Степень
 пробирки   2М СН3СООН           Н2О     раствора   помутнения
     1           1,6              0,4      3,8
     2           0,8              1,2      4,1
     3           0,4              1,6      4,4
     4           0,2              1,8      4,7
     5           0,1              1,9      5,0
     6          0,06             1,94      5,3

    4.2. Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка ме-
тодом высаливания.
    Яичный белок состоит из нескольких белков, отличающихся
друг от друга по растворимости. При помощи метода высалива-
ния из него можно выделить альбумины и глобулины.
    4.2.1. К 20 каплям неразбавленного яичного белка добавляют
сухую соль хлорида натрия до насыщения раствора, т. е. до того
момента, когда соль перестанет растворяться. Выпадает белый
аморфный осадок глобулинов. Через 10–12 мин произойдет их
полное осаждение. После этого осадок отфильтровывают через
бумажный фильтр. Пробирку с фильтратом кипятят или проводят
с ее содержимым биуретовую реакцию. Отрицательная реакция
указывает на отсутствие белка, положительная – на его присутст-
вие. Делают вывод о наличии белка в фильтрате.
    4.2.2. К 20 каплям неразбавленного яичного белка добавляют
20 капель насыщенного раствора сульфата аммония и перемеши-
вают. Получается полунасыщенный раствор сульфата аммония,
в котором выпадает осадок яичного глобулина. Через 5–10 мин
осадок отфильтровывают. В фильтрате остается яичный альбу-
мин. Для его высаливания к фильтрату прибавляют сухую соль
сульфата аммония до полного насыщения раствора. Выпавший
осадок альбумина отфильтровывают, а фильтрат кипятят или
проводят с ним биуретовую реакцию. Отрицательная реакция
указывает на отсутствие белка. Делают вывод о высаливающей
способности хлорида натрия и сульфата аммония.
    4.3. Осаждение белков при нагревании в разных средах.
    Берут пять пробирок, наливают в каждую по 0,5 мл раствора
разбавленного яичного белка. Затем в первую пробирку добавля-
                                  16

Страницы