Биохимия. Березовская В.А. - 43 стр.

UptoLike

Составители: 

ний слой приобретает желтовато-красную или красную окраску
в результате окисления α-токоферола в α-токоферилхинон.
4.4. Качественные реакции на витамин К (викасол).
4.4.1. Реакция со щелочным раствором цистеина.
В пробирку вносят 5 капель 0,1%-ного спиртового раствора
викасола, добавляют 2 капли 0,02%-ного раствора цистеина, 2 кап-
ли 10%-ного раствора гидроксида натрия и тщательно перемеши-
вают. Раствор в пробирке приобретает лимонно-желтый цвет.
4.4.2. Реакция с анилином.
В пробирку вносят 10 капель 0,1%-ного спиртового раствора
викасола, добавляют 5 капель раствора анилина и перемешивают.
Раствор в пробирке приобретает красный цвет.
4.5. Качественные реакции на витамин В
1
(тиамин).
4.5.1. Диазореакция.
В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует слож-
ное комплексное соединение оранжевого цвета.
В пробирку вносят 5 капель 1%-ного раствора сульфанило-
вой кислоты и 5 капель 5%-ного раствора нитрита натрияполу-
чают диазореактив. Добавляют к нему 1–2 капли 5%-ного раство-
ра тиамина или тиаминхлорида и 5–7 капель 10%-ного раствора
бикарбоната натрия. Раствор в пробирке окрашивается в оранже-
во-красный цвет. Если раствор бикарбоната прибавлять осторож-
но по стенке пробирки (наклонив ее), образуется оранжево-
красное кольцо на границе раздела двух жидкостей.
4.5.2. Реакция окисления.
В щелочной среде тиамин окисляется гексоцианоферратом
(III) калия в тиохром, который при ультрафиолетовом облучении
имеет сине-голубую флюоресценцию.
В пробирку вносят 1–2 капли 5%-ного раствора тиамина или
тиаминхлорида, прибавляют 5–10 капель 10%-ного раствора гид-
роксида натрия, 1–2 капли гексоцианоферрата (III) калия и тща-
тельно перемешивают. Пробирку нагревают на водяной бане, при
этом вследствие образования тиохрома раствор окрашивается в
желтый цвет. Раствор охлаждают, добавляют 1 мл изобутилового
спирта и интенсивно взбалтывают не менее 1 мин. После этого
дают раствору отстояться, затем верхний спиртовой слой перено-
сят при помощи пипетки в другую пробирку. Рассматривают его
43
ний слой приобретает желтовато-красную или красную окраску
в результате окисления α-токоферола в α-токоферилхинон.
    4.4. Качественные реакции на витамин К (викасол).
    4.4.1. Реакция со щелочным раствором цистеина.
    В пробирку вносят 5 капель 0,1%-ного спиртового раствора
викасола, добавляют 2 капли 0,02%-ного раствора цистеина, 2 кап-
ли 10%-ного раствора гидроксида натрия и тщательно перемеши-
вают. Раствор в пробирке приобретает лимонно-желтый цвет.
    4.4.2. Реакция с анилином.
    В пробирку вносят 10 капель 0,1%-ного спиртового раствора
викасола, добавляют 5 капель раствора анилина и перемешивают.
Раствор в пробирке приобретает красный цвет.
     4.5. Качественные реакции на витамин В1 (тиамин).
     4.5.1. Диазореакция.
     В щелочной среде тиамин с диазореактивом образует слож-
ное комплексное соединение оранжевого цвета.
     В пробирку вносят 5 капель 1%-ного раствора сульфанило-
вой кислоты и 5 капель 5%-ного раствора нитрита натрия – полу-
чают диазореактив. Добавляют к нему 1–2 капли 5%-ного раство-
ра тиамина или тиаминхлорида и 5–7 капель 10%-ного раствора
бикарбоната натрия. Раствор в пробирке окрашивается в оранже-
во-красный цвет. Если раствор бикарбоната прибавлять осторож-
но по стенке пробирки (наклонив ее), образуется оранжево-
красное кольцо на границе раздела двух жидкостей.
     4.5.2. Реакция окисления.
     В щелочной среде тиамин окисляется гексоцианоферратом
(III) калия в тиохром, который при ультрафиолетовом облучении
имеет сине-голубую флюоресценцию.
     В пробирку вносят 1–2 капли 5%-ного раствора тиамина или
тиаминхлорида, прибавляют 5–10 капель 10%-ного раствора гид-
роксида натрия, 1–2 капли гексоцианоферрата (III) калия и тща-
тельно перемешивают. Пробирку нагревают на водяной бане, при
этом вследствие образования тиохрома раствор окрашивается в
желтый цвет. Раствор охлаждают, добавляют 1 мл изобутилового
спирта и интенсивно взбалтывают не менее 1 мин. После этого
дают раствору отстояться, затем верхний спиртовой слой перено-
сят при помощи пипетки в другую пробирку. Рассматривают его
                              43