Биохимия. Березовская В.А. - 46 стр.

UptoLike

Составители: 

калия, 2 капли 5%-ного раствора гексоцианоферрата (III) калия и
быстро перемешивают. Затем прибавляют 6–8 капель 10%-ного
раствора соляной кислоты и 1–2 капли раствора хлорида железа.
Выпадает сине-зеленый осадок берлинской лазури.
4.10. Количественное определение витамина С.
Содержание витамина С в исследуемом материале определя-
ют титрометрическим методом с помощью титрованного раство-
ра 2,6-дихлорфенолиндофенола. Этим методом определяют толь-
ко восстановленную форму аскорбиновой кислоты. Для того
чтобы витамин С не разрушался в процессе опыта, титрование
ведут в кислой среде.
4.10.1. Определение титра раствора 2,6-дихлорфенол-
индофенола.
2,6-дихлорфенолиндофенол не отвечает требованиям, предъ-
являемым к исходным веществам, поэтому раствор точной кон-
центрации по его навеске приготовить нельзя. Готовят раствор
приблизительной концентрации (0,001 н) и устанавливают его
титр. Для этого 2 мл 0,1%-ного раствора аскорбиновой кислоты
растворяют в 50 мл 2%-ного раствора серной кислоты. Затем 5 мл
полученного раствора вносят в колбу для титрования и титруют
его 2,6-дихлорфенолиндофенолом до появления розового окра-
шивания. Определяют объем 2,6-дихлорфенолиндофенола, кото-
рый прошел на титрование.
Затем берут такой же объем аскорбиновой кислоты (5 мл),
добавляют в него несколько кристаллов (не более 0,1 г) иодида
калия, 5 капель 1%-ного раствора крахмала и титруют из другой
микробюретки 0,001 н раствором иодата калия. Титрование ведут
до появления едва заметного синего окрашивания и определяют
пошедший на него объем иодата калия.
Поскольку титруются одинаковые объемы аскорбиновой ки-
слоты, количества пошедших на титрование иодата калия и
2,6-дихлорфенолиндофенола эквивалентны друг другу. Так как
1 мл 0,001 н раствора иодата калия эквивалентен 0,088 мг аскор-
биновой кислоты, титр раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола
(в мг аскорбиновой кислоты) будет определяться по формуле
2
1
088,0
V
V
Т
=
,
46
калия, 2 капли 5%-ного раствора гексоцианоферрата (III) калия и
быстро перемешивают. Затем прибавляют 6–8 капель 10%-ного
раствора соляной кислоты и 1–2 капли раствора хлорида железа.
Выпадает сине-зеленый осадок берлинской лазури.
    4.10. Количественное определение витамина С.
    Содержание витамина С в исследуемом материале определя-
ют титрометрическим методом с помощью титрованного раство-
ра 2,6-дихлорфенолиндофенола. Этим методом определяют толь-
ко восстановленную форму аскорбиновой кислоты. Для того
чтобы витамин С не разрушался в процессе опыта, титрование
ведут в кислой среде.
    4.10.1. Определение титра раствора 2,6-дихлорфенол-
индофенола.
    2,6-дихлорфенолиндофенол не отвечает требованиям, предъ-
являемым к исходным веществам, поэтому раствор точной кон-
центрации по его навеске приготовить нельзя. Готовят раствор
приблизительной концентрации (0,001 н) и устанавливают его
титр. Для этого 2 мл 0,1%-ного раствора аскорбиновой кислоты
растворяют в 50 мл 2%-ного раствора серной кислоты. Затем 5 мл
полученного раствора вносят в колбу для титрования и титруют
его 2,6-дихлорфенолиндофенолом до появления розового окра-
шивания. Определяют объем 2,6-дихлорфенолиндофенола, кото-
рый прошел на титрование.
    Затем берут такой же объем аскорбиновой кислоты (5 мл),
добавляют в него несколько кристаллов (не более 0,1 г) иодида
калия, 5 капель 1%-ного раствора крахмала и титруют из другой
микробюретки 0,001 н раствором иодата калия. Титрование ведут
до появления едва заметного синего окрашивания и определяют
пошедший на него объем иодата калия.
    Поскольку титруются одинаковые объемы аскорбиновой ки-
слоты, количества пошедших на титрование иодата калия и
2,6-дихлорфенолиндофенола эквивалентны друг другу. Так как
1 мл 0,001 н раствора иодата калия эквивалентен 0,088 мг аскор-
биновой кислоты, титр раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола
(в мг аскорбиновой кислоты) будет определяться по формуле
                              0,088 ⋅ V1
                         Т=              ,
                                 V2

                               46