Биохимия. Березовская В.А. - 53 стр.

    4.2. Влияние температуры на скорость ферментативного
катализа.
    Берут четыре пробирки, наливают в них по 10 капель
0,5%-ного раствора крахмала (субстрата). Затем первую пробирку
ставят в снег (лед), вторую оставляют при комнатной температу-
ре (15–20°С), третью ставят в термостат при температуре 45ºС,
четвертую – в водяную баню при температуре 75ºС. В четыре
другие пробирки наливают по 10 капель дистиллированной воды
и по 1 капле 0,1%-ного раствора йода. Через 5 мин в пробирки с
крахмалом добавляют по 10 капель слюны, разведенной в 10 раз
(1 капля слюны и 9 капель воды), хорошо перемешивают и остав-
ляют при той же температуре (0, 15–20, 45 и 75ºС).
    Через 5 мин после того, как в пробирки добавили слюну, из
каждой из них берут по 1–2 капле жидкости и вносят в заготов-
ленные пробирки с йодом. Если во всех пробирках жидкость ок-
расится в синий цвет, реакцию повторяют через 5 мин со вновь
приготовленными пробирками с раствором йода, а затем повто-
ряют еще через 5 мин.
     Различная окраска при реакции с йодом, а следовательно, раз-
ная степень гидролиза крахмала обусловлена разной скоростью
ферментативного катализа при разных температурных условиях
опыта. В работе важно уловить нужный момент для йодной пробы,
так как при длительном гидролизе полное расщепление крахмала
может произойти и при низких температурах опыта. Результаты
работы оформляются в виде табл. 2, делаются выводы.
                                                                 Таблица 2

                Влияние температуры на действие фермента

 Температура,      Окраска крахмала с йодом через определенное время, мин
      ºС               5              10            15             20
      0º
    15–20º
     45º
     75º

    4.3. Влияние рН среды на активность амилазы.
    В семь пробирок наливают растворы 0,2 М двузамещенного
фосфорнокислого натрия и 0,1 М лимонной кислоты в количествах,
указанных в табл. 3. Получают буферные растворы с рН от 5,5 до 8.
                                    53