Биохимия. Березовская В.А. - 61 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

КамчатГТУ | Петропавловск-Камчатский

Составители: 

Рубрика: 

Значение оптической плотности глюкозы
№
пробирки
Фильтрат, мл
Калибровочный
раствор, мл
Реактив,
мл
Д
(оптическая
плотность)
1 0,20 – 2,00
2 – 0,20 2,00
Раствор сравнения готовят, смешивая 0,2 мл раствора три-
хлоруксусной кислоты и 2 мл ортотолуидинового реактива, но в
качестве его обычно используют воду. Это связано с тем, что в
ТХК не содержится даже следов глюкозы, поэтому окраска с ор-
тотолуидиновым реактивом не развивается. Для получения точ-
ных данных измерение должно быть проведено не позже 30 мин
после охлаждения пробирок!
4.3.2. Определение оптической плотности глюкозы в калиб-
ровочном растворе.
Готовят калибровочный раствор глюкозы с концентрацией
10 ммоль/л. Для этого к 0,2 мл эталонного раствора глюкозы
(концентрация 25 ммоль/л) прибавляют 0,3 мл дистиллированной
воды. Определение оптической плотности полученного раствора
ведут аналогично определению оптической плотности глюкозы в
полученном фильтрате (п. 4.3.1) и параллельно ему. Эталон и
раствор сравнения не центрифугируют. Пробу и калибровочный
раствор можно отмерять одной и той же микропипеткой. Резуль-
тат определения записывают в таблицу.
При повышенных концентрациях глюкозы, особенно при
анализе мочи, пробу необходимо разводить 2 и даже 10 раз дис-
тиллированной водой. Дальнейший ход работы остается без из-
менений, а результаты анализа умножают на число разведений.
4.4. Определение содержания глюкозы.
Содержание глюкозы рассчитывают по формуле
10⋅=
B
A
X
,
где X – содержание глюкозы, ммоль/л;
А – оптическая плотность пробы;
В – оптическая плотность эталона;
10 – концентрация глюкозы в калибровочном растворе,
ммоль/л.
61
               Значение оптической плотности глюкозы

                                                            Д
    №                      Калибровочный    Реактив,
            Фильтрат, мл                               (оптическая
 пробирки                    раствор, мл       мл
                                                        плотность)
    1           0,20            –             2,00
    2            –             0,20           2,00

    Раствор сравнения готовят, смешивая 0,2 мл раствора три-
хлоруксусной кислоты и 2 мл ортотолуидинового реактива, но в
качестве его обычно используют воду. Это связано с тем, что в
ТХК не содержится даже следов глюкозы, поэтому окраска с ор-
тотолуидиновым реактивом не развивается. Для получения точ-
ных данных измерение должно быть проведено не позже 30 мин
после охлаждения пробирок!
    4.3.2. Определение оптической плотности глюкозы в калиб-
ровочном растворе.
    Готовят калибровочный раствор глюкозы с концентрацией
10 ммоль/л. Для этого к 0,2 мл эталонного раствора глюкозы
(концентрация 25 ммоль/л) прибавляют 0,3 мл дистиллированной
воды. Определение оптической плотности полученного раствора
ведут аналогично определению оптической плотности глюкозы в
полученном фильтрате (п. 4.3.1) и параллельно ему. Эталон и
раствор сравнения не центрифугируют. Пробу и калибровочный
раствор можно отмерять одной и той же микропипеткой. Резуль-
тат определения записывают в таблицу.
    При повышенных концентрациях глюкозы, особенно при
анализе мочи, пробу необходимо разводить 2 и даже 10 раз дис-
тиллированной водой. Дальнейший ход работы остается без из-
менений, а результаты анализа умножают на число разведений.
    4.4. Определение содержания глюкозы.
    Содержание глюкозы рассчитывают по формуле
                               A
                          X = ⋅ 10 ,
                               B
где X – содержание глюкозы, ммоль/л;
    А – оптическая плотность пробы;
    В – оптическая плотность эталона;
    10 – концентрация глюкозы в калибровочном растворе,
ммоль/л.
                              61

Страницы