Введение в прикладную биотехнологию. Ефимова М.В. - 15 стр.

    Однако при многократных пересевах увеличивается возможность
потери активности продуцента, поэтому любой продуцент лучше хра-
нить в консервированном виде.
    Для длительного хранения ряда штаммов часто используют крах-
мальные среды. Более длительное время можно хранить культуру под
слоем стерильного, химически чистого вазелинового масла. Хранят куль-
туры при температуре –14 … –11ºС с пересевами через 10–16 месяцев.
    Грибные и дрожжеподобные культуры хранят в 10%-ном растворе
глицерина в запаянных ампулах в атмосфере жидкого азота при темпе-
ратурах –196 … –165ºС. Эти культуры даже через 5 лет сохраняют свои
физиолого-биохимические свойства.
    В настоящее время самый распространенный способ сохранения
микробных культур – лиофилизация. Она заключается в том, что вода
при пониженном атмосферном давлении испаряется из замороженного
материала, превращаясь в пар, минуя жидкое состояние. В целях увели-
чения выживаемости вегетативных клеток микробов перед лиофилиза-
цией их, как правило, помещают в защитные среды (стерильную бычью
сыворотку, лошадиную сыворотку, смесь 10%-ного раствора сахарозы
и 1%-ного раствора желатина). Защитные среды, очевидно, регулируют
осмотическое давление клетки при высушивании. Микроорганизмы
помещают в стерильные ампулы, закрывают стерильными ватными
тампонами и быстро замораживают при температуре –78 … –35ºС,
затем высушивают в вакуум-сушильном аппарате при температуре
20 – 22ºС и остаточном давлении 10 Па в течение 25–30 ч, после чего
ампулы запаивают и хранят до 5–6 лет.
    Штаммы можно хранить в стерильной почве. Часто хранят штаммы
на распаренном зерне (пшене). В этом случае 100 г пшена кипятят в
течение 30 мин с 80 см3 воды, высыпают на чистый стол и разбивают
комки. Остывшие зерна по 15–16 г засыпают в стерильные флаконы
вместимостью 250 см3, закрывают ватной пробкой и стерилизуют при
давлении 0,1 МПа в течение 40 мин. На стерильное распаренное пшено
наносят 2 см3 густой взвеси спор или 3 см3 вегетативной биомассы про-
дуцента. Микроорганизмы выращивают при периодическом встряхива-
нии при температуре 25–30ºС. Готовую культуру высушивают в вакуу-
ме при температуре 25ºС в течение 60–70 ч.
    Заготовленные чистые культуры микроорганизмов по мере необхо-
димости подают в промышленное производство.
    Методика реактивации существенно отражается на выживаемости
клеток и должна разрабатываться для каждой культуры отдельно.
    Часто при переходе от лабораторных условий к культивированию в
промышленных масштабах происходит утрата свойств продуцентов.
    Получение чистой культуры можно осуществлять в лабораторном
ферментаторе периодического или непрерывного действия (рис. 3).
                                 15