Введение в прикладную биотехнологию. Ефимова М.В. - 21 стр.

с выемкой на поверхности. Тем временем вдоль ДНК-копии наслаива-
ются новые рибосомы, и таким образом образуется все больше молекул
амилазы. На самом деле все эти процессы значительно сложнее.
     В июле 1980 г. в одной из лондонских больниц 17 добровольцам
были сделаны инъекции инсулина. Инсулин обычно получают из под-
желудочных желез убойных свиней и крупного рогатого скота. В инсу-
лине свиньи лишь в одном участке цепи содержится аминокислота,
иная, чем у человека; а инсулин крупного рогатого скота отличается по
трем аминокислотам. Поэтому у некоторых больных диабетом выраба-
тываются антитела. В подобных случаях помочь может только инсулин
человека, который стали получать с помощью кишечной палочки.
     Идея заключалась в том, чтобы в ДНК бактерий внести ген чело-
веческого инсулина (подложить «куриное яйцо»). Быть может, рибосо-
мы бактерий обманутся и начнут продуцировать человеческий белок
как свой собственный?
     Необходимо было средство для транспортирования гена человече-
ского инсулина в бактериальную клетку. Таким «транспортным средст-
вом» послужили плазмиды. Плазмиды – это кольцевые молекулы не-
хромосомной ДНК с малой молекулярной массой, кодированные для
вторичных признаков. Они являются векторной группой в методике
генной инженерии.
     Оказывается, именно с плазмидами связана приспособительная спо-
собность микроорганизмов к антибиотикам. Плазмиды содержат, напри-
мер, гены пенициллиназ – ферментов, расщепляющих пенициллин.
При воздействии пенициллина на клетки их плазмиды передают своим ри-
босомам приказ о выработке пенициллиназ, которые инактивируют пени-
циллин. Микробная клетка остается жизнеспособной. Кроме того, при со-
прикосновении двух бактерий плазмида может перейти из одной
бактерии в другую и передать ей приказ к защите против пенициллина.
     С. Коэн (1928 г.) предложил использовать «страсть плазмид к пу-
тешествиям» для транспортировки генов (рис. 5). Для этого нужно из-
влечь плазмидное кольцо бактерий, разрезать его, вставить участок
чужой ДНК с приказом о выработке белка и ввести обратно в бактерию
новое плазмидное кольцо с чужим геном.
     В 1960-х гг. швейцарский биохимик Вернер Арбер открыл фермен-
ты, «разрезающие» ДНК на участки. Эти ферменты называются рест-
риктазы. В 1970-х гг. Герберт Бойер в Сан-Франциско установил, что
рестриктазы разрезают плазмиды только в определенных местах. Дру-
гие исследователи открыли лигазы, которые снова «склеивают» разре-
занные участки.
     В 1973 г. Коэн и Бойер выделили из микробной клетки плазмиды
и «разрезали» их. Затем они выделили ДНК из клеток лягушек, «выре-
зали» из них с помощью рестриктаз гены. В пробирку со смесью после
                                 21