Введение в прикладную биотехнологию. Ефимова М.В. - 64 стр.

         7.1.2. Выделение чистой культуры микроводорослей

     При выделении чистой культуры сине-зеленых водорослей возни-
кает ряд затруднений, связанных с очисткой от сопутствующих водо-
рослей и бактерий. Процесс еще более усложняется, если культура си-
не-зеленых водорослей длительно развивалась в лабораторных условиях
и создалась стойкая ассоциация с другими спутниками. Поэтому при
выделении чистой культуры прибегают к предварительной процедуре
отмывания от сопутствующих организмов либо на крупнопористых
мембранных или ядерных фильтрах, либо на сеточках, используемых
для электронной микроскопии. Далее чистую культуру изолируют на
твердых средах стандартным клонированием отдельных колоний.
     Другой способ очистки сине-зеленых водорослей от спутников ос-
нован на их способности к скользящему движению. Сущность способа
заключается в том, что свежеотобранный материал, содержащий сине-
зеленые водоросли, после предварительного отмывания на фильтре или
на сеточках помещается на поверхность подсушенной агаризованной
среды в чашку Петри. Затем под бинокулярной лупой через каждые 2 ч
ведут наблюдения за нитями водорослей: отползшие нити поддевают
тонко оттянутым носиком пастеровской пипетки, переносят в жидкую
среду, разлитую в пробирки по 1–2 см3, и экспонируют на свету. Кон-
центрация агара в среде не должна превышать 0,8–1,2%. Такую среду
разливают в чашки Петри и подсушивают либо при комнатной темпера-
туре двое суток, либо в сушильном шкафу при температуре 65ºС в тече-
ние 4–6 ч.
     Для дальнейшего культивирования используют питательную среду
BG-11. Эта среда поддерживает прекрасный или умеренный рост пре-
сноводных сине-зеленых водорослей. Для выращивания культур, выде-
ленных из мест обитания со щелочной реакцией среды, используют
среду М. В табл. 4 приведен химический состав питательных сред.

                                                            Таблица 4

                                    Содержание        Содержание
    Наименование химического
                                    компонента        компонента
          компонента
                                  в среде BG-11, г    в среде М, г
                1                         2                 3
 NaNO3                                   1,5              0,75
 K2HPO4 · H2O                           0,04              0,02
 MgSO4 · 7H2O                          0,075              0,038
 CaCl2 · 2H2O                          0,036              0,018
 Лимонная кислота                      0,006              0,003


                                64