Физиологическое состояние дрожжей. Меледина Т.В - 36 стр.

UptoLike

36
3.2.3. Окраска клеток раствором Люголя
Физиологическое состояние можно определить также по сос-
таву клетки, например по запасным углеводам, одним из которых
является гликоген.
Количество гликогена в клетках дрожжей меняется в зависи-
мости от их возраста и условий культивирования. Для оценки исполь-
зуется раствор Люголя. Раствор Люголя окрашивает клетки в желтый
цвет, а гликоген в коричневый.
Количество гликогена в дрожжах меняется в зависимости от их
возраста и условий культивирования. В зрелых клетках гликоген за-
нимает от 1/3 до 2/3 клетки и более. В клетках с низкой физиологи-
ческой активностью окрашенный гликоген занимает менее 1/4 клет-
ки. В молодых клетках гликоген отсутствует, а клетки при окраши-
вании раствором йода приобретают бледно-желтый цвет.
Приборы и посуда:
микроскоп;
обезжиренные предметные и покровные стекла;
тонкая стеклянная палочка.
Реактивы:
краситель раствор Люголя.
Материалы:
суспензия дрожжей концентрацией около 10
7
клеток/мл;
фильтровальная бумага.
Приготовление раствора Люголя: 2 г йодистого калия
растворяют в 5 мл дистиллированной воды; 1 г кристаллического
йода добавляют к раствору. После растворения йода полученный
раствор доводят дистиллированной водой до объема 300 мл.
Методика окрашивания
Для качественной оценки уровня гликогена в дрожжевых
клетках на предметное стекло петлей наносят небольшое количество
дрожжевой суспензии и 2 3 капли раствора Люголя. Каплю накры-
вают покровным стеклышком, излишек жидкости удаляют фильтро-
вальной бумагой и микроскопируют. Через 2 3 мин клетки дрожжей
окрашиваются в желтый цвет, а гликоген в коричневый.