Составители:
Рубрика:
34
3.2.1. Окраска дрожжей метиленовым синим
Наибольшее распространение получил метод выявления мерт-
вых клеток с помощью метиленового синего.
После попадания в клеточную цитоплазму под действием
ферментов редуктаз этот краситель восстанавливается живыми дрож-
жевыми клетками до бесцветных соединений. Мертвые клетки окра-
шиваются в синий цвет. Эффективность данного метода зависит не
только от состояния клеточной мембраны, но и от активности окси-
доредуктаз в клетке.
Приборы и посуда:
микроскоп;
предметные и покровные стекла;
тонкая стеклянная палочка.
Реактивы:
метиленовая синь.
Материалы:
суспензия дрожжей концентрацией около 10
7
клеток/мл.
Методика окрашивания
Для определения количества мертвых клеток на предметное
стекло наносят по одной капле нефильтрованной дрожжевой суспен-
зии и раствора метиленовой сини (1:5000). Каплю закрывают по-
кровным стеклом, излишек жидкости собирают листком фильтро-
вальной бумаги и через 2 мин наблюдают окрашенный препарат
с помощью микроскопа. В поле зрения микроскопа считают общее
количество дрожжевых клеток, затем только синие, после чего пре-
парат передвигают и подсчет ведут в новом поле зрения. Таким обра-
зом подсчитывают общее количество клеток (не менее 500) в пяти
полях зрения. После под
счета вычисляют количество мертвых
клеток в процентах.
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 32
- 33
- 34
- 35
- 36
- …
- следующая ›
- последняя »
