Составители:
Рубрика:
35
3.2.2. Окраска клеток метиленовым синим и сафранином
Более полную информацию о физиологическом состоянии
дрожжей дает окрашивание фиксированных препаратов метиленовым
синим, танином и сафранином. Сафранин применяется для выяв-
ления клеточных ядер, которые окрашиваются в красный цвет. Если
клетки живые и содержат оксидоредуктазы, расщепляющие мети-
леновый синий, то окрашенный препарат приобретает красноватый,
а не фиолетовой оттенок.
Приборы и посуда:
микроскоп;
предметные и покровные стекла;
тонкая стеклянная палочка.
Реактивы:
краситель метиленовый синий;
краситель сафранин;
5 %-й раствор танина в воде;
физиологический раствор (0,9 %-й раствор NaCl).
Материалы:
суспензия дрожжей концентрацией около 10
7
клеток/мл.
Методика окрашивания
Дрожжи отцентрифугировать в течение 5 мин при скорости
4000 об/мин. Слить надосадочную жидкость, промыть физиоло-
гическим раствором и снова отцентрифугировать. Приготовить сус-
пензию дрожжей.
Нанести каплю суспензии дрожжей на обезжиренное мылом
предметное стекло. Оставить высыхать на воздухе при комнатной
температуре. После высыхания капли зафиксировать препарат (10 раз
провести стеклом в пламени спиртовки). Нагревать несильно. Не
пережигать. Залить стекло раствором метиленового синего и вы-
держать в течение 4 мин при комнатной температуре. Смыть
краситель теплой водой. Залить стекло свежеприготовленным
раствором танина на 2 мин. Смыть краситель под струей воды.
Залить на 16 мин стекло раствором сафронина. Смыть краситель.
Микроскопирование следует проводить нефлюоресцирующим
маслом при увеличении 400х.
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 33
- 34
- 35
- 36
- 37
- …
- следующая ›
- последняя »
