Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 42 стр.

UptoLike

Рубрика: 

раствора метиленового синего (до окрашивания смеси в
голубой цвет). Содержимое пробирок перемешивают и
одновременно помещают их в водяную баню при
температуре 37-40°С. Через 5-10 мин наблюдается
обесцвечивание метиленового синего в первой пробирке и
отсутствие обесцвечивания в двух других. Первую пробирку
сильно взбалтывают, вновь появляется синее окрашивание
вследствие окисления лейкооснования метиленовой сини
кислородом воздуха.
Сукцинатдегидрогеназа (флавопротеид) окисляет
янтарную кислоту в фумаровую. В роли промежуточного
акцептора водорода в данном опыте выступает метиленовая
синь, которая далее ( при встряхивании) отдает принятый
водород кислороду воздуха.
Лабораторная работа:
Групповая специфичность
действия сахаразы
(B-D-фруктофуранозид - фруктогидролаза; КФ 3. 2. 1. 26)
Оборудование:. Баня водяная; термометр лабораторный;
пипетки градуированные на 2 мл. (3 шт.), 5 мл (2 шт.);
Реактивы:мука соевая (1%-ная); дрожжевая сахараза;
сахароза (1%-ная); раффиноза (1%-ная); фелингова
жидкость.
Ход работы: В одну пробирку наливают 2 мл 1%-ного
раствора сахарозы, а в другую - 2 мл 1%-ного раствора
раффинозы. Добавляют в обе пробирки по 1 мл 1%-ного
раствора препарата дрожжевой сахаразы и, перемешав
содержимое каждой пробирки, ставят их на 5-10 мин в
водяную баню при 35-40°С. Затем исследуют содержимое
обеих пробирок на присутствие восстанавливающих
углеводов. Для этого в обе пробирки наливают по З мл
фелинговой жидкости, хорошо промешивают и смесь
нагревают до кипения. В обеих пробирках проба с
фелинговой жидкостью положительна, так как β-
гликозидная связь гидролизуется в присутствии сахарозы,
так и раффинозы.
Лабораторная работа: Абсолютная специфичность
действия уреазы
(карбамидамидогидролаза; КФ 3. 5. 1. 5)
Оборудование:. Пипетки с одной меткой на 5 мл (2 шт.);
Реактивы: соевая мука); красная лакмусовая бумажка,
мочевина (5%~ная); ацетамид (5%-ный).
раствора метиленового       синего (до окрашивания смеси в       сахароза (1%-ная);        раффиноза (1%-ная);     фелингова
голубой цвет).     Содержимое пробирок перемешивают         и    жидкость.
одновременно помещают их            в   водяную      баню при    Ход работы: В одну пробирку наливают 2 мл 1%-ного
температуре      37-40°С.   Через   5-10   мин    наблюдается    раствора сахарозы, а в другую - 2 мл 1%-ного раствора
обесцвечивание метиленового синего в первой пробирке и           раффинозы. Добавляют в обе пробирки по 1 мл 1%-ного
отсутствие обесцвечивания в двух других. Первую пробирку         раствора препарата дрожжевой сахаразы и, перемешав
сильно взбалтывают, вновь появляется синее окрашивание           содержимое каждой пробирки, ставят их на 5-10 мин в
вследствие окисления лейкооснования метиленовой сини             водяную баню при 35-40°С. Затем исследуют содержимое
кислородом воздуха.                                              обеих   пробирок     на    присутствие   восстанавливающих
      Сукцинатдегидрогеназа         (флавопротеид)    окисляет   углеводов. Для этого в обе пробирки наливают по       З мл
янтарную кислоту в фумаровую. В роли промежуточного              фелинговой жидкости,        хорошо промешивают и смесь
акцептора водорода в данном опыте выступает метиленовая          нагревают до кипения.        В обеих пробирках проба с
синь, которая далее ( при встряхивании) отдает принятый          фелинговой    жидкостью положительна,           так как β-
водород кислороду воздуха.                                       гликозидная связь гидролизуется в присутствии сахарозы,
                                                                 так и раффинозы.

    Лабораторная работа: Групповая специфичность
                                                                    Лабораторная работа: Абсолютная специфичность
                      действия сахаразы
                                                                                      действия уреазы
(B-D-фруктофуранозид - фруктогидролаза; КФ 3. 2. 1. 26)                  (карбамидамидогидролаза; КФ 3. 5. 1. 5)

Оборудование:. Баня водяная; термометр лабораторный;
пипетки градуированные на 2 мл. (3 шт.), 5 мл (2 шт.);           Оборудование:. Пипетки с одной меткой на 5 мл (2 шт.);
                                                                 Реактивы: соевая мука); красная лакмусовая бумажка,
Реактивы:мука соевая (1%-ная); дрожжевая сахараза;               мочевина (5%~ная); ацетамид (5%-ный).