ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
21
7 ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ
Опыт 1. Определение изоэлектрической точки белка
В изоэлектрическом состоянии белки обладают наименьшей
растворимостью. Вследствие этого даже при очень незначитель-
ных внешних воздействиях (охлаждении, добавлении электроли-
та, нерастворителя) белки выпадают в осадок. По помутнению
раствора можно экспериментально определить значение рН сре-
ды, при котором белковые молекулы находятся в изоэлектриче-
ском состоянии.
Реактивы и оборудование: пипетки на 1 мл, пробирки,
штатив, водный раствор яичного белка, буферные растворы.
Ход опыта
1. Возьмите 4 пробирки, в каждую из них прилейте 0,5 мл
водного раствора белка и добавьте 1 мл буферных растворов со
значениями рН, указанными в табл. 3. Содержимое пробирок ос-
торожно перемешайте.
2. В пробирки добавьте по 0,5 мл этилового спирта. При
значении рН, равном или близком к ИЭТ белка, последний выпа-
дает в осадок. Величина рH буферного раствора, при которой
наблюдается наибольшее помутнение, соответствует изоэлек-
трической точке белка.
На основании экспериментально полученных данных сде-
лайте заключение о величине ИЭТ яичного белка и объясните
роль спирта для процесса высаливания.
Таблица 3
Компоненты № пробирки
1 2 3 4
Буферная смесь, мл 1,0 1,0 1,0 1,0
рН буферной смеси 3,7 4,7 5,6 6,0
Белок, мл 0,5 0,5 0,5 0,5
Спирт, мл 0,5 0,5 0,5 0,5
PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
7 ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ Опыт 1. Определение изоэлектрической точки белка В изоэлектрическом состоянии белки обладают наименьшей растворимостью. Вследствие этого даже при очень незначитель- ных внешних воздействиях (охлаждении, добавлении электроли- та, нерастворителя) белки выпадают в осадок. По помутнению раствора можно экспериментально определить значение рН сре- ды, при котором белковые молекулы находятся в изоэлектриче- ском состоянии. Реактивы и оборудование: пипетки на 1 мл, пробирки, штатив, водный раствор яичного белка, буферные растворы. Ход опыта 1. Возьмите 4 пробирки, в каждую из них прилейте 0,5 мл водного раствора белка и добавьте 1 мл буферных растворов со значениями рН, указанными в табл. 3. Содержимое пробирок ос- торожно перемешайте. 2. В пробирки добавьте по 0,5 мл этилового спирта. При значении рН, равном или близком к ИЭТ белка, последний выпа- дает в осадок. Величина рH буферного раствора, при которой наблюдается наибольшее помутнение, соответствует изоэлек- трической точке белка. На основании экспериментально полученных данных сде- лайте заключение о величине ИЭТ яичного белка и объясните роль спирта для процесса высаливания. Таблица 3 Компоненты № пробирки 1 2 3 4 Буферная смесь, мл 1,0 1,0 1,0 1,0 рН буферной смеси 3,7 4,7 5,6 6,0 Белок, мл 0,5 0,5 0,5 0,5 Спирт, мл 0,5 0,5 0,5 0,5 21 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version www.pdffactory.com
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 19
- 20
- 21
- 22
- 23
- …
- следующая ›
- последняя »