ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
4.6. Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика 100 мг кристаллического человеческого
альбумина растворяют в 10 мл физиологического раствора и делают следующие разведения:
Раствор 1. 100 мг альбумина + 10 мл 0,85% раствора поваренной соли = 10 мг белка в
1 мл.
Раствор 2. 2 мл раствора 1 + 0,7 мл физ.раствор = 7 мг белка в 1 мл.
Раствор 3. 4 мл раствора 2 + 4 мл физ.раствора = 5 мг белка в 1 мл.
Раствор 4. 5 мл раствора 3 + 5 мл физ.раствора = 2,5 мг белка в 1 мл.
Раствор 5. 5 мл раствора 4 + 5 мл физ.раствора = 1,5 мг белка в 1 мл.
Раствор 6. 5 мл раствора 5 + 5 мл физ.раствора = 0,625 мг белка в 1 мл.
Из каждого разведения берут по одному мл для проведения биуретовой реакции..
Для построения калибровочного графика (средние данные, полученные из 4-х по-
вторностей) на оси ординат откладывают оптическую плотность, а на оси абсцисс – концен-
трацию альбумина, выраженную в мг на мл измеряемого раствора.
4.7. Расчет степени денатурации белка
Степень денатурации белков устанавливают по уменьшению растворимости по фор-
муле:
исх
дисх
Б
ББ
СД
100)(
%
⋅
−
= ,
где: Б
д
- количество растворимых белков после денатурации,%;
Б
исх
- количество растворимых белков в исходной пробе до денатурации, %.
Регистрируемые показатели:
Количество белка, найденное по калибровочному графику (C), мг/мл;
Объем разведения (V), мл;
Масса навески (П), г;
Количество растворимых белков после денатурации (Б
д
), %;
Количество растворимых белков в исходной пробе до денатурации (Б
исх
), %;
Степень денатурации белка (СД), %
4.8. Контрольные вопросы
1. Понятие денатурации.
2. Какие факторы способны денатурировать белки?
3. Существует ли разница между денатурацией и коагуляцией?
4. Как коагуляция белков влияет на их биологическую ценность?
5. Изменяются ли физические свойства белка в процессе денатурации, какие имен-
но?
6. Как изменяется биологическая активность белка при денатурации?
7. Структуры белковой молекулы.
8. Приведите примеры соле-, водо-, щелоче-, спирто-растворимых белков.
9. Какие изменения могут происходить с белками сырья при хранении в процессе
технологической обработки?
10. Что происходит в процессе встряхивания белоксодержащего сырья с КСI ?
4.6. Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика 100 мг кристаллического человеческого
альбумина растворяют в 10 мл физиологического раствора и делают следующие разведения:
Раствор 1. 100 мг альбумина + 10 мл 0,85% раствора поваренной соли = 10 мг белка в
1 мл.
Раствор 2. 2 мл раствора 1 + 0,7 мл физ.раствор = 7 мг белка в 1 мл.
Раствор 3. 4 мл раствора 2 + 4 мл физ.раствора = 5 мг белка в 1 мл.
Раствор 4. 5 мл раствора 3 + 5 мл физ.раствора = 2,5 мг белка в 1 мл.
Раствор 5. 5 мл раствора 4 + 5 мл физ.раствора = 1,5 мг белка в 1 мл.
Раствор 6. 5 мл раствора 5 + 5 мл физ.раствора = 0,625 мг белка в 1 мл.
Из каждого разведения берут по одному мл для проведения биуретовой реакции..
Для построения калибровочного графика (средние данные, полученные из 4-х по-
вторностей) на оси ординат откладывают оптическую плотность, а на оси абсцисс – концен-
трацию альбумина, выраженную в мг на мл измеряемого раствора.
4.7. Расчет степени денатурации белка
Степень денатурации белков устанавливают по уменьшению растворимости по фор-
муле:
( Бисх − Бд ) ⋅ 100
СД % = ,
Бисх
где: Бд - количество растворимых белков после денатурации,%;
Бисх - количество растворимых белков в исходной пробе до денатурации, %.
Регистрируемые показатели:
Количество белка, найденное по калибровочному графику (C), мг/мл;
Объем разведения (V), мл;
Масса навески (П), г;
Количество растворимых белков после денатурации (Бд), %;
Количество растворимых белков в исходной пробе до денатурации (Бисх), %;
Степень денатурации белка (СД), %
4.8. Контрольные вопросы
1. Понятие денатурации.
2. Какие факторы способны денатурировать белки?
3. Существует ли разница между денатурацией и коагуляцией?
4. Как коагуляция белков влияет на их биологическую ценность?
5. Изменяются ли физические свойства белка в процессе денатурации, какие имен-
но?
6. Как изменяется биологическая активность белка при денатурации?
7. Структуры белковой молекулы.
8. Приведите примеры соле-, водо-, щелоче-, спирто-растворимых белков.
9. Какие изменения могут происходить с белками сырья при хранении в процессе
технологической обработки?
10. Что происходит в процессе встряхивания белоксодержащего сырья с КСI ?
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 15
- 16
- 17
- 18
- 19
- …
- следующая ›
- последняя »
