Методические указания к выполнению лабораторного практикума по курсу "Пищевая химия". Чиркина Т.Ф. - 34 стр.

                                   Лабораторная работа №9

                            Обнаружение антибиотиков в молоке

       Цель работы: ознакомиться с методикой определения антибиотиков в молоке.
       Антибиотики в молоке являются чужеродными веществами, могут попасть в него при
непосредственном лечении вымени или опосредованно, через корма или при лечении самого
животного. Методы обнаружения антибиотиков в молоке основаны на восстановлении реза-
зурина или метиленового голубого при развитии в молоке чувствительного к антибиотикам
микроорганизмам вида Streptoccocus thermofilus. Метод позволяет обнаружить пенициллин
более 0,01 МЕ/мл, стрептомицин более 30 мкг/мл, тетрациклин – от 1 МЕ/мл, олендомицин –
от 10 МЕ/мл.

      9.1. Алгоритм работы

          Сформулировать этапы выполнения лабораторной работы.
          Подготовить рабочую тест-культуру.

      9.2. Определение антибиотиков

       Техника выполнения. В чистую пробирку наливают 10 мл исследуемого молока, за-
крывают резиновой пробкой и нагревают на водяной бане до 85÷900С с выдержкой 10 минут,
затем охлаждают до 42÷450С. После этого в пробирку вносят стерильной пипеткой 0,3 мл
рабочей тест-культуры. Содержимое пробирки тщательно перемешивают путем 3-кратного
перевертывания, после чего пробирку выдерживают в водяной бане при температуре
42÷430С в течении 1 час. 40 мин – 2 час. 20 мин. Затем в пробирку вносят 1 мл 0,05%-ного
раствора резазурина с температурой не ниже 18÷200С и тщательно перемешивают, перевер-
тывая пробирку. Пробирку с молоком и резазурином выдерживают при 42÷430С в течение 15
минут.
       В случае использования метиленового голубого его вносят одновременно с рабочей
тест-культурой в количестве 0,1 мл 0,5%-ного раствора.
       Примечание: растворы резазурина и метиленового голубого готовятся на дистиллиро-
ванной кипяченой воде.

      9.3. Чтение результатов

       При отсутствии в молоке антибиотиков, ферменты, выделяемые термофильным
стрептококком, восстанавливают краситель, и молоко будет иметь белый или розовый цвет.
       При наличии антибиотиков, они ингибируют развитие тест-культуры, в результате че-
го она не вырабатывает ферменты, и красители не восстанавливаются, при этом молоко ок-
рашено в их цвет: в случае с резазурином – сине-стальной, сине-фиолетовый, в случае с ме-
тиленовым голубым – голубой. Голубое кольцо, образующееся в пробирке на поверхности
молока высотой 1 см, не учитывают.
       Регистрируемые показатели:

      Окраска исследуемых проб.

      9.4. Контрольные вопросы
      1. Что такое нитраты?
      2. Почему говорят об опасности нитратов для людей?
      3. Допустимая суточная доза нитратов для человека?