ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
Завершающим этапом выделения чистой культуры микроорганизмов неизвестного вида является проверка
ее чистоты на изолированной среде визуально (просмотр посева невооруженным глазом) и микроскопией маз-
ка.
Видовое название чистых культур большинства микроорганизмов устанавливают путем изучения морфоло-
гических, культуральных и физиологических свойств. Для идентификации плесневых грибов достаточно изучить
морфологические и культуральные свойства. По совокупности изученных признаков определяют таксономиче-
ское положение (положение в систематике) микроорганизмов, пользуясь специальными определителями.
Морфологические свойства исследуют при микроскопии прижизненных или фиксированных окрашенных
препаратов. Морфологическая характеристика микроорганизма должна включать форму клеток, их сочетание и
размеры, подвижность, способность к образованию спор, наличие включений. При описании морфологии сле-
дует указывать возраст культуры, состав среды, условия культивирования.
Культуральные свойства микроорганизмов устанавливают по особенностям роста на питательных средах.
На жидких питательных средах отмечают характер распределения культуры – равномерное, вызывающее по-
мутнение среды, придонное или поверхностное, что обусловлено отношением микроорганизмов к кислороду
воздуха. Мутность среды может быть хлопьевидной, однородной. Пленка – тонкой, плотной и рыхлой, гладкой,
морщинистой или складчатой. Осадок – скудным или обильным (количество); плотным, рыхлым, слизистым
(консистенция).
На плотных питательных средах исследуют характер колоний. Поскольку колония образуется в результате
размножения одной клетки, то ее строение зависит от особенностей деления клеток данного вида микроорга-
низмов. Наиболее типично видовые признаки выражены у поверхностных колоний:
• форму, профиль, блеск и цвет отмечают визуально;
• край и структуру – при малом увеличении микроскопа;
• консистенцию (мягкая, слизистая, тягучая или хрупкая) определяют прикосновением к ее поверхности
петлей;
• размеры – обычной линейкой или окулярным микрометром при малом увеличении микроскопа (коло-
нии точечные – менее 1 мм в диаметре, мелкие – 1–2, крупные – более 4 мм).
Физиологические свойства микроорганизмов обусловлены ферментативной активностью и, следовательно,
выражают особенности обмена веществ клетки. Это важный дифференциальный признак, который использует-
ся при идентификации бактериальных и дрожжевых видов. Распространенным методом изучения физиологиче-
ских свойств микроорганизмов является выращивание их на дифференциально-диагностических средах, позво-
ляющих определить биохимическую активность микроорганизмов в отношении веществ, введенных в среду.
Отношение к кислороду (тип дыхания) определяется по характеру роста в столбике агара (МПА) при посе-
ве уколом. После инкубации в термостате в течение 48 ч при температуре 30 – 38 °С возможны три типа роста в
зависимости от типа дыхания:
• рост шляпкой на поверхности (аэробные микроорганизмы);
• рост у дна пробирки (анаэробные микроорганизмы);
• рост, равномерный по всей длине укола (факультативно анаэробные микроорганизмы).
Протеолитические свойства определяют по выделению из питательной среды газов – продуктов расщепле-
ния белка; для этой цели культуру выращивают на МПБ или мясной воде, закрепив в пробирке полоску фильт-
ровальной бумажки, пропитанную реактивом, реагирующим на наличие определенного газа. Так, выделение
аммиака обнаруживают по синему цвету лакмусовой бумажки, сероводорода – с помощью фильтровальной
бумаги, пропитанной уксуснокислым свинцом (бумага чернеет в результате образования сернистого свинца),
индола – с помощью бумажки, пропитанной щавелевой кислотой (покраснение в результате образования со-
единения с индолом).
О протеолитических свойствах микробов судят также по способности разжижать желатин. При посеве
уколом в столбик желатина через 2 часа культивирования отмечают наличие и характер разжижения – послой-
ное, воронкообразное, пузырчатое.
Сахаролитические свойства определяют на МПБ, 1 %-ном растворе пептонной воды и др., содержащих тот
или иной углевод и индикатор. Расщепление углеводов под влиянием микробов сопровождается изменением
цвета индикатора в результате подкисления среды, а на жидких средах в ряде случаев и газообразованием, ко-
торое улавливают с помощью стеклянного «поплавка». Образовавшийся газ вытесняет среду и обнаруживается
в поплавке в виде пузырька.
Характер свертывания лакмусового молока является важным биохимическим признаком. При посеве на
лакмусовое молоко отмечают изменения рН и характер сгустка. В зависимости от того, на какую составную
часть молока действуют ферменты изучаемого микроорганизма, различают следующие изменения в молоке:
а) кислотное свертывание – действие фермента на лактозу – сопровождается образованием плотного сгу-
стка и повышением кислотности; цвет молока изменяется от сиреневого к красному;
б) пептонизация – действие протеолитических ферментов на белки молока – сопровождается образованием
мутной желтоватой жидкости, среда становится щелочной из-за выделения аммиака и молоко синеет.
О способности расти на картофеле выявляют при посеве микроорганизмов на скошенный стерильный
ломтик картофеля. При этом отмечают дополнительный культуральный признак, а также амилолитическую
способность культуры по пробе с йодом. Посинение среды после нанесения капли раствора Люголя в зоне рос-
та микроорганизмов указывает на наличие у них фермента амилазы.
Следует подчеркнуть, что перечень исследуемых признаков, как и методы культивирования, дифференци-
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 3
- 4
- 5
- 6
- 7
- …
- следующая ›
- последняя »
