ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
К другой части кислого раствора белка осторожно добавляют
разбавленный раствор щелочи по каплям при встряхивании. При
постепенной нейтрализации избытка кислоты образуется осадок белка,
снова растворяющийся в избытке щелочи. Добавив 1-2 см
3
раствора
щелочи, нагревают полученную щелочную жидкость до кипения; при этом
свертывания белка не наблюдается.
2.2 Опыт № 2: Высаливание белков из растворов
Т е х н и к а о п р е д е л е н и я
Реактивы: раствор белка
раствор сульфата аммония массовой долей 43 %
сульфат аммония кристаллический
К 3-4 см
3
раствора белка добавляют равный объем насыщенного
раствора сульфата аммония и слегка встряхивают смесь . Появляется муть
или хлопья выпадающих в осадок глобулинов. Отлив около 1 см
3
мутной
жидкости в отдельную пробирку, добавляют в нее 2-3 см
3
воды; при
встряхивании осадок белка снова растворяется.
Главную часть полученной мутной жидкости фильтруют через сухой
складчатый фильтр, прозрачный фильтрат делят на две части. Одну часть
фильтрата нагревают до кипения и наблюдают свертывание находящегося
в растворе белка, который выделяется в виде хлопьев или мути. К другой
части фильтрата добавляют при легком встряхивании 1-2 г
кристаллического сульфата аммония до прекращения его растворения. При
этом в жидкости над небольшим осадком избытка кристаллов соли
появляется муть или хлопья высаленного белка. При последующем
добавлении двойного объема воды выделившийся осадок снова
растворяется.
2.3 Опыт № 3: Термическая денатурация белка
Т е х н и к а о п р е д е л е н и я
Реактивы: раствор белка
раствор сульфата аммония массовой долей 15 %
концентрированная уксусная кислота
раствор гидроксида натрия массовой долей 10 %
В пробирку наливают 2-3 см
3
раствора белка и нагревают его в
пламени горелки до кипения в течение 0,5-1 мин. Белок выпадает в осадок
в виде мути и хлопьев. Затем слегка охлаждают жидкость, делят ее на две
части и добавляют к одной из них 1-2 капли раствора концентрированной
уксусной кислоты, а к другой – 1-2 капли раствора сульфата аммония.
Снова слегка нагревают обе смеси до начала кипения; при этом в обеих
пробирках количество свернувшегося белка заметно увеличивается.
К слегка охлажденной смеси в одной из пробирок добавляют, при
встряхивании, сначала равный объем воды, затем 1 см
3
разбавленного
К другой части кислого раствора белка осторожно добавляют
разбавленный раствор щелочи по каплям при встряхивании. При
постепенной нейтрализации избытка кислоты образуется осадок белка,
снова растворяющийся в избытке щелочи. Добавив 1-2 см3 раствора
щелочи, нагревают полученную щелочную жидкость до кипения; при этом
свертывания белка не наблюдается.
2.2 Опыт № 2: Высаливание белков из растворов
Техника определения
Реактивы: раствор белка
раствор сульфата аммония массовой долей 43 %
сульфат аммония кристаллический
3
К 3-4 см раствора белка добавляют равный объем насыщенного
раствора сульфата аммония и слегка встряхивают смесь . Появляется муть
или хлопья выпадающих в осадок глобулинов. Отлив около 1 см3 мутной
жидкости в отдельную пробирку, добавляют в нее 2-3 см3 воды; при
встряхивании осадок белка снова растворяется.
Главную часть полученной мутной жидкости фильтруют через сухой
складчатый фильтр, прозрачный фильтрат делят на две части. Одну часть
фильтрата нагревают до кипения и наблюдают свертывание находящегося
в растворе белка, который выделяется в виде хлопьев или мути. К другой
части фильтрата добавляют при легком встряхивании 1-2 г
кристаллического сульфата аммония до прекращения его растворения. При
этом в жидкости над небольшим осадком избытка кристаллов соли
появляется муть или хлопья высаленного белка. При последующем
добавлении двойного объема воды выделившийся осадок снова
растворяется.
2.3 Опыт № 3: Термическая денатурация белка
Техника определения
Реактивы: раствор белка
раствор сульфата аммония массовой долей 15 %
концентрированная уксусная кислота
раствор гидроксида натрия массовой долей 10 %
В пробирку наливают 2-3 см3 раствора белка и нагревают его в
пламени горелки до кипения в течение 0,5-1 мин. Белок выпадает в осадок
в виде мути и хлопьев. Затем слегка охлаждают жидкость, делят ее на две
части и добавляют к одной из них 1-2 капли раствора концентрированной
уксусной кислоты, а к другой – 1-2 капли раствора сульфата аммония.
Снова слегка нагревают обе смеси до начала кипения; при этом в обеих
пробирках количество свернувшегося белка заметно увеличивается.
К слегка охлажденной смеси в одной из пробирок добавляют, при
встряхивании, сначала равный объем воды, затем 1 см3 разбавленного
