ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
ладони, подушечки пальцев и под ногтями. То есть смыв осуще-
ствляется в направлении проводят его от менее загрязненных
частей к более загрязненным. Если одного тампона для смыва
мало (в процессе обработки он становится недостаточно влаж-
ным), его помещают в колбу. Затем берут второй, смачивают его
и продолжают делать смыв. Протирают руку сухим ватным там-
поном в той же последовательности, что и смачивали. Все тампо-
ны помещают в колбу с физиологическим раствором и переме-
шивают не менее 5 мин.
Обработайте тампонами свои руки согласно вышеуказан-
ной последовательности. Перемешайте содержимое колбы.
Отберите стерильной пипеткой 1 мл раствора и соверши-
те пересев на среду КМАФАнМ согласно рис.1. на стр. 25 данных
методических указаний.
Количество микроорганизмов на единице площади (МА-
ФАнМ, КОЕ/кв.см) исследуемого объекта вычисляется по фор-
муле:
,
где К - количество мезофильных аэробных и факультативно-
анаэробных микроорганизмов на единице площади объекта,
КОЕ/кв. см;
а - количество микроорганизмов выросших на чашке Петри,
КОЕ;
б - разведение, по посеву из которого велся подсчет микроорга-
низмов, выросших на чашке Петри;
с - объем смывной воды, мл;
d - площадь смыва, кв. см.
Определение обсемененности объекта вычисляют по каж-
дой чашке Петри отдельно. Затем рассчитывают величину его
средней обсемененности.
Задание 2. Провести микробиологический контроль смы-
вов с рабочих столов.
Методика выполнения задания.
Для проведения смыва необходим трафарет, колба со 100
мл стерильного физиологического раствора, стерильные ватные
тампоны, пинцет и спиртовка.
Трафарет и пинцет обжигают в пламени спиртовки и ох-
лаждают на воздухе, не допуская попадания на них микроорга-
низмов. Охлажденный трафарет прикладывают к определенному
участку поверхности, ограничивая тем самым участок смыва. Ох-
лажденным пинцетом берут стерильный ватный тампон и вносят
в колбу со стерильным физиологическим раствором (пробку, ко-
торой была закрыта колба, на стол не класть!). Тампон слегка
смачивают, так чтобы жидкость с него не стекала, достают из
колбы (колбу после этого сразу же закрывают пробкой) и тща-
тельно протирают ограниченную трафаретом площадь, плотно
прижимая трафарет к поверхности, чтобы он на ней не переме-
щался. После чего тампон переносят в колбу с физиологическим
раствором.
Пинцетом (больше его не обжигать) берут второй ватный
тампон, вытирают им смоченную поверхность и помещают его в
туже колбу. Аналогичным образом делают смывы еще с трех вы-
бранных участков поверхности. Все тампоны помещают в одну и
туже колбу. После этого содержимое колбы перемешивается в
течение не менее чем 5 мин, чтобы микроорганизмы смылись с
ваты и равномерно распределились в физиологическом растворе.
При перемешивании надо следить за тем, чтобы жидкость с мик-
роорганизмами не попала на пробку. (При анализе мелких пред-
метов (ножей, стаканов и т.д.) смыв проводят со всей их поверх-
ности). Далее из колбы делается посев и подсчет колоний (мето-
дика описана в задании 1) данной работы. Посевы выдерживают
в течение 72 часов при температуре 30
о
С.
Задание 3. Провести анализ посевов и идентифицирова-
ние выросших колоний (после инкубации и появления колоний).
Методика выполнения.
Для распознавания преобладающих в исследуемом объек-
те бактерий производят разбор колоний по преобладающим ти-
пам. Для этого внимательно рассматривают их под лупой и отме-
чают колонии со схожими признаками. Описывают их и опреде-
ляют несколько наиболее распространенных типов колоний. Из
обособленных колоний наиболее массовых типов делают мазки,
окрашивают их по Граму. Микроскопируют препараты с исполь-
зованием объектива 100х (90х) и определяют преобладающие
группы бактерий. Микрокартину зарисовывают в тетрадь.
30
29
ладони, подушечки пальцев и под ногтями. То есть смыв осуще- Трафарет и пинцет обжигают в пламени спиртовки и ох-
ствляется в направлении проводят его от менее загрязненных лаждают на воздухе, не допуская попадания на них микроорга-
частей к более загрязненным. Если одного тампона для смыва низмов. Охлажденный трафарет прикладывают к определенному
мало (в процессе обработки он становится недостаточно влаж- участку поверхности, ограничивая тем самым участок смыва. Ох-
ным), его помещают в колбу. Затем берут второй, смачивают его лажденным пинцетом берут стерильный ватный тампон и вносят
и продолжают делать смыв. Протирают руку сухим ватным там- в колбу со стерильным физиологическим раствором (пробку, ко-
поном в той же последовательности, что и смачивали. Все тампо- торой была закрыта колба, на стол не класть!). Тампон слегка
ны помещают в колбу с физиологическим раствором и переме- смачивают, так чтобы жидкость с него не стекала, достают из
шивают не менее 5 мин. колбы (колбу после этого сразу же закрывают пробкой) и тща-
Обработайте тампонами свои руки согласно вышеуказан- тельно протирают ограниченную трафаретом площадь, плотно
ной последовательности. Перемешайте содержимое колбы. прижимая трафарет к поверхности, чтобы он на ней не переме-
Отберите стерильной пипеткой 1 мл раствора и соверши- щался. После чего тампон переносят в колбу с физиологическим
те пересев на среду КМАФАнМ согласно рис.1. на стр. 25 данных раствором.
методических указаний. Пинцетом (больше его не обжигать) берут второй ватный
Количество микроорганизмов на единице площади (МА- тампон, вытирают им смоченную поверхность и помещают его в
ФАнМ, КОЕ/кв.см) исследуемого объекта вычисляется по фор- туже колбу. Аналогичным образом делают смывы еще с трех вы-
муле: бранных участков поверхности. Все тампоны помещают в одну и
туже колбу. После этого содержимое колбы перемешивается в
течение не менее чем 5 мин, чтобы микроорганизмы смылись с
, ваты и равномерно распределились в физиологическом растворе.
где К - количество мезофильных аэробных и факультативно- При перемешивании надо следить за тем, чтобы жидкость с мик-
анаэробных микроорганизмов на единице площади объекта, роорганизмами не попала на пробку. (При анализе мелких пред-
КОЕ/кв. см; метов (ножей, стаканов и т.д.) смыв проводят со всей их поверх-
а - количество микроорганизмов выросших на чашке Петри, ности). Далее из колбы делается посев и подсчет колоний (мето-
КОЕ; дика описана в задании 1) данной работы. Посевы выдерживают
б - разведение, по посеву из которого велся подсчет микроорга- в течение 72 часов при температуре 30оС.
низмов, выросших на чашке Петри; Задание 3. Провести анализ посевов и идентифицирова-
с - объем смывной воды, мл; ние выросших колоний (после инкубации и появления колоний).
d - площадь смыва, кв. см. Методика выполнения.
Определение обсемененности объекта вычисляют по каж- Для распознавания преобладающих в исследуемом объек-
дой чашке Петри отдельно. Затем рассчитывают величину его те бактерий производят разбор колоний по преобладающим ти-
средней обсемененности. пам. Для этого внимательно рассматривают их под лупой и отме-
Задание 2. Провести микробиологический контроль смы- чают колонии со схожими признаками. Описывают их и опреде-
вов с рабочих столов. ляют несколько наиболее распространенных типов колоний. Из
Методика выполнения задания. обособленных колоний наиболее массовых типов делают мазки,
Для проведения смыва необходим трафарет, колба со 100 окрашивают их по Граму. Микроскопируют препараты с исполь-
мл стерильного физиологического раствора, стерильные ватные зованием объектива 100х (90х) и определяют преобладающие
тампоны, пинцет и спиртовка. группы бактерий. Микрокартину зарисовывают в тетрадь.
30
29
