Физиологическое состояние дрожжей. Меледина Т.В - 25 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

Университет ИТМО | Санкт-Петербург

Составители: 

Рубрика: 

25
Метиленовый синий (рН 4,6) можно заменить метиленовым
фиолетовым (рН 10,6). В щелочной среде достигается более надеж-
ный и менее субъективный результат с лучшей корреляцией размно-
жения клеток и их окислительной способности.
Поскольку у оптических отбеливателей (красителей, исполь-
зуемых при светлопольной микроскопии) существует много огра-
ничений, вместо них были предложены флуоресцентные красители.
Действие этих красителей основано на:
целостности мембраны. Красители Mg-ANS – магниевая
соль 1-анилино-8-нафтален сульфоновой кислоты, пропидия йодид,
Sytox оранжевый; Berberinej TZK, FUN-1;
потенциале мембраны (Oxonol и Rhodamine 123);
использовании эстеразосодержащих субстратов (диацетат
флуоресцеина, диацетат карбоксифлуоресцеина и уксуснометиловый
эфир кальцеина).
Для оценки жизнеспособности пивоваренных дрожжей приме-
няют Mg-ANS, Oxonol, Sytox оранжевый и Berberinej TZK. На неко-
торых пивоваренных предприятиях используют Mg-ANS, поскольку
считается, что он дает хорошие результаты при исследовании дрожжей
с низкой жизнеспособностью, иногда наблюдающейся при повы-
шенной концентрации сусла. Преимуществом флуоресцентных краси-
телей является возможность их использования с проточной цито-
метрией. Это повышает чувствительность и объективность метода
и снижает его трудоемкость.
2.1.2. Методы, основанные на размножении клеток
Существуют два основных способа, основанных на размно-
жении клеток: выращивание на чашках и на предметных стеклах.
Выращивание клеток на чашках производится на поверхности агари-
зованной питательной среды, налитой в чашку. Жизнеспособность
оценивается по количеству КОЕ (колониеобразующих единиц) после
их культивирования в течение 72 ч при температуре 27 °С. Отноше-
ние КОЕ к общему числу клеток в разведении выражается в процен-
тах. Коэффициент вариации (относительное стандартное отклонение)
при использовании этих способов составляет 20 %. Этот метод мо-
жет быть использован для прямого определения способности клетки

Страницы