Лабораторные методы по ветериарно-санитарной экспертизе мяса. Сперанский В.В - 5 стр.

UptoLike

В бактериоскопии применяют метод изучения
морфологических свойств микроба и метод изучения
подвижности микробов. Изучение морфологии
микроорганизмов в окрашенном виде является наиболее
распространенным микробиологическим методом.
Приготовление препарата заключается в
приготовлении мазка, его высушивании, фиксации и
окраске. (ГОСТ «Мясо Методы бактериологического
анализа). Срезы пробы (маленькие кусочки мяса размером 2
х 2,5 см) прикладывают к предварительно
профламбированному предметному стеклу (по 3 отпечатка на
двух стеклах). Мазки-отпечатки подсушивают на воздухе,
фиксируют над пламенем горелки (прикрепление микробов к
стеклумедленным трехкратным проведением препарата,
мазком кверху, через пламя горелки, так чтобы препарат в
пламени находился не более 2 с). При излишнем нагревании
изменяется структура микроорганизмов, мазок плохо
окрашивается, при недостаточной фиксации при
последующей обработке мазок можно смыть. Мазки можно
погружать в фиксирующие жидкости: в метиленовый спирт
на 5 мин.; в этиловый спиртна 15-20 мин. После фиксации
мазок высушивают на воздухе.
Окраска. Существуют простые и сложные способы
окрашивания. Простая окраска: на фиксированный мазок
наливают водный раствор фуксина Пфейфера (несколько мл
на 1-2 мин) или раствор метиленовой синина 3-5 мин.
Затем краску слить, мазок промыть дистиллированной водой
и просушивают фильтровальной бумагой. Сложные или
дифференциальные способы применяют для изучения
структуры и дифференциации микробов. Наиболее часто
применяемая окраска по Граму. По отношению к краске все
бактерии по Граму подразделяются на две группы: прочно
воспринимающие генцианвиолетграмположительные и
грамотрицательные, у которых эта краска обесцвечивается
спиртом. Грамположительныеостаются окрашенными в
темно-фиолетовый. Техника окраски: на фиксированный
мазок накладывают полоску фильтровальной бумаги,
пропитанной и высушенной раствором кристалвиолета,
наносят несколько капель воды,которая полностью
впитывается бумагой (плотно прилегает к стеклу),
выдерживают 2 мин, затем удаляют бумагу пинцетом и
наливают пипеткой раствор Люголя (мазок чернеет), через 1
мин сливают раствор Люголя и наливают на мазок спирт на 1
мин, причем препарат нужно покачивать и менять спирт.
Затем промывают водой и дополнительно окрашивают
фуксином в течение 1-2 мин. Сливают краску, промывают
водой, обсушивают фильтровальной бумагой.
Грамотрицательные, обесцвеченные спиртом, окрашиваются
дополнительной краской (они окрашены в розово-красный
цвет). Мазки просматривают под иммерсионной системой.
При бакскопии прежде всего исключают сибирскую язву:
наличие грамположительных палочек с "обрубленными"
концами дает возможность сделать предварительное
заключение об обнаружении микробов, характерных для
возбудителя сибирской язвы; наличие грамотрицательных
палочек с закругленными концами вызывает подозрение на
обсемененность сальмонеллами.
Количественный учет микроорганизмов (общая
микробная обсемененность) ведут методом подсчета в 25
полях зрения на одном предметном стекле.
При микроскопировании мазков-отпечатков отмечают
степень окраски, наличие распада мышечной ткани,
исчерченность волокон, ядра мышечных волокон.
При необходимости пробы отправляют для
бактериологического исследования, которое проводят по
определенной схеме. Придерживаясь схемы можно
сравнительно быстро (в течение трех суток) дать заключение
о наличии в мясе возбудителей основных микробных
инфекций, вызываемых аэробами (сибирская язва, рожа
свиней, пастереллез, листериоз, кокковая инфекция …), а
       В бактериоскопии применяют метод изучения              темно-фиолетовый. Техника окраски: на фиксированный
морфологических свойств микроба и метод изучения              мазок накладывают полоску фильтровальной бумаги,
подвижности        микробов.      Изучение      морфологии    пропитанной и высушенной раствором кристалвиолета,
микроорганизмов в окрашенном виде является наиболее           наносят несколько капель воды,которая полностью
распространенным микробиологическим методом.                  впитывается бумагой (плотно прилегает к стеклу),
       Приготовление       препарата      заключается     в   выдерживают 2 мин, затем удаляют бумагу пинцетом и
приготовлении      мазка,   его высушивании, фиксации и       наливают пипеткой раствор Люголя (мазок чернеет), через 1
окраске. (ГОСТ «Мясо Методы             бактериологического   мин сливают раствор Люголя и наливают на мазок спирт на 1
анализа). Срезы пробы (маленькие кусочки мяса размером 2      мин, причем препарат нужно покачивать и менять спирт.
х     2,5     см)    прикладывают      к     предварительно   Затем промывают водой и дополнительно окрашивают
профламбированному предметному стеклу (по 3 отпечатка на      фуксином в течение 1-2 мин. Сливают краску, промывают
двух стеклах). Мазки-отпечатки подсушивают на воздухе,        водой,     обсушивают        фильтровальной        бумагой.
фиксируют над пламенем горелки (прикрепление микробов к       Грамотрицательные, обесцвеченные спиртом, окрашиваются
стеклу – медленным трехкратным проведением препарата,         дополнительной краской (они окрашены в розово-красный
мазком кверху, через пламя горелки, так чтобы препарат в      цвет). Мазки просматривают под иммерсионной системой.
пламени находился не более 2 с). При излишнем нагревании      При бакскопии прежде всего исключают сибирскую язву:
изменяется структура микроорганизмов, мазок плохо             наличие грамположительных палочек с "обрубленными"
окрашивается,      при    недостаточной     фиксации    при   концами дает возможность сделать предварительное
последующей обработке мазок можно смыть. Мазки можно          заключение об обнаружении микробов, характерных для
погружать в фиксирующие жидкости: в метиленовый спирт         возбудителя сибирской язвы; наличие грамотрицательных
на 5 мин.; в этиловый спирт – на 15-20 мин. После фиксации    палочек с закругленными концами вызывает подозрение на
мазок высушивают на воздухе.                                  обсемененность сальмонеллами.
       Окраска. Существуют простые и сложные способы                 Количественный учет       микроорганизмов (общая
окрашивания. Простая окраска: на фиксированный мазок          микробная обсемененность) ведут методом подсчета в 25
наливают водный раствор фуксина Пфейфера (несколько мл        полях зрения на одном предметном стекле.
на 1-2 мин) или раствор метиленовой сини – на 3-5 мин.               При микроскопировании мазков-отпечатков отмечают
Затем краску слить, мазок промыть дистиллированной водой      степень окраски, наличие распада мышечной ткани,
и просушивают фильтровальной бумагой. Сложные или             исчерченность волокон, ядра мышечных волокон.
дифференциальные способы применяют для изучения                      При    необходимости    пробы     отправляют     для
структуры и дифференциации микробов. Наиболее часто           бактериологического исследования, которое проводят по
применяемая окраска по Граму. По отношению к краске все       определенной схеме. Придерживаясь схемы можно
бактерии по Граму подразделяются на две группы: прочно        сравнительно быстро (в течение трех суток) дать заключение
воспринимающие генцианвиолет – грамположительные и            о наличии в мясе возбудителей основных микробных
грамотрицательные, у которых эта краска обесцвечивается       инфекций, вызываемых аэробами (сибирская язва, рожа
спиртом. Грамположительные – остаются окрашенными в           свиней, пастереллез, листериоз, кокковая инфекция …), а