Биохимия зерна, биохимия хлебопечения- биохимия бродильных производств. Владимирова Е.Г - 10 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ОГУ | Оренбург

Составители: 

Рубрика: 

Испытуемый материал: солод.
Реактивы: соляная кислота С(HCl)=0,1 моль/дм
3
соляная кислота ω(HCl) =20 %
гидрофосфат натрия С(Na
2
HPO
4
) = 0,15 моль/дм
3
раствор йода
раствор крахмала ω =2 %
буферный раствор с рН = 5,6
сернокислая медь
ω
(CuSO
4
) = 6 %
едкий натр
ω (NaOH) = 1,25 %
сернокислая медь (раствор Фелинга I)
ω
(CuSO
4
) = 4 %
щелочной раствор сегнетовой соли (раствор Фелинга II)
раствор железоаммиачных квасцов
раствор перманганата калия С(1/5 KMnO
4
) = 0,1 моль/дм
3
Выделение α- и β-амилаз солода.
Навеску измельченного солода 20 г смешивают со 100 см
3
дистиллированной воды в фарфоровом стакане или колбе и беспрерывно
перемешивают в течение 15 мин. Затем всю массу оставляют на 30 мин на льду
или в холодной воде. По истечении этого времени снова производят
перемешивание, после чего массу отжимают через ткань и фильтруют через
сухой складчатый фильтр или центрифугируют. Вытяжка из солода содержит
α- и β-амилазы.
α-Амилаза может быть изолирована из вытяжки солода при следующих
условиях: 10 см
3
солодовой вытяжки в пробирке прогревают на водяной бане
при 70
о
С в течение 15 минут (указанная температура должна строго
соблюдаться), после чего раствор охлаждают и берут на исследование
активности α-амилазы. β-амилаза при указанной температуре инактивируется.
β-Амилаза может быть изолирована из солодовой вытяжки путем
инактивирования α-амилазы в кислой среде. Для этого поступают так: 15 см
3
солодовой вытяжки вносят в стаканчик, добавляют 3 см
3
раствора соляной
кислоты с концентрацией 0,1 моль/дм
3
и 12 см
3
воды с тем, чтобы общий объем
составлял 30 см
3
(рН при этом должен быть 3,3) и оставляют на льду или в
холодильнике на 15 мин.
По истечении этого времени к раствору добавляют 6 см
3
раствора
гидрофосфата натрия С(Na
2
HPO
4
) = 0,15 моль/дм
3
для того, чтобы довести рН
до 6,0. в дальнейшем этот раствор берут для определения осахаривающей
способности β-амилазы.
Опыт 1. Определение декстринирующей способности α-амилазы.
При действии на крахмал α-амилазы образуется большое количество
декстринов разного молекулярного веса, по-разному окрашивающихся йодом.
В зависимости от окраски с йодом различают следующие промежуточные
продукты расщепления крахмала:
10
     Испытуемый материал: солод.
     Реактивы: соляная кислота С(HCl)=0,1 моль/дм3
               соляная кислота ω(HCl) =20 %
               гидрофосфат натрия С(Na2HPO4) = 0,15 моль/дм3
               раствор йода
               раствор крахмала ω =2 %
               буферный раствор с рН = 5,6
               сернокислая медь ω (CuSO4) = 6 %
              едкий натр ω (NaOH) = 1,25 %
              сернокислая медь (раствор Фелинга I) ω (CuSO4) = 4 %
              щелочной раствор сегнетовой соли (раствор Фелинга II)
              раствор железоаммиачных квасцов
              раствор перманганата калия С(1/5 KMnO4 ) = 0,1 моль/дм3

     Выделение α- и β-амилаз солода.

       Навеску измельченного солода 20 г смешивают со 100 см3
дистиллированной воды в фарфоровом стакане или колбе и беспрерывно
перемешивают в течение 15 мин. Затем всю массу оставляют на 30 мин на льду
или в холодной воде. По истечении этого времени снова производят
перемешивание, после чего массу отжимают через ткань и фильтруют через
сухой складчатый фильтр или центрифугируют. Вытяжка из солода содержит
α- и β-амилазы.
       α-Амилаза может быть изолирована из вытяжки солода при следующих
условиях: 10 см3 солодовой вытяжки в пробирке прогревают на водяной бане
при 70оС в течение 15 минут (указанная температура должна строго
соблюдаться), после чего раствор охлаждают и берут на исследование
активности α-амилазы. β-амилаза при указанной температуре инактивируется.
       β-Амилаза может быть изолирована из солодовой вытяжки путем
инактивирования α-амилазы в кислой среде. Для этого поступают так: 15 см3
солодовой вытяжки вносят в стаканчик, добавляют 3 см3 раствора соляной
кислоты с концентрацией 0,1 моль/дм3 и 12 см3 воды с тем, чтобы общий объем
составлял 30 см3 (рН при этом должен быть 3,3) и оставляют на льду или в
холодильнике на 15 мин.
       По истечении этого времени к раствору добавляют 6 см3 раствора
гидрофосфата натрия С(Na2HPO4) = 0,15 моль/дм3 для того, чтобы довести рН
до 6,0. в дальнейшем этот раствор берут для определения осахаривающей
способности β-амилазы.

     Опыт 1. Определение декстринирующей способности α-амилазы.

      При действии на крахмал α-амилазы образуется большое количество
декстринов разного молекулярного веса, по-разному окрашивающихся йодом.
      В зависимости от окраски с йодом различают следующие промежуточные
продукты расщепления крахмала:
10

Страницы