Биохимия зерна, биохимия хлебопечения- биохимия бродильных производств. Владимирова Е.Г - 13 стр.

UptoLike

В мерную колбу на 100 см
3
вносят 50 см
3
2 %-ного раствора крахмала и
5 см
3
соответствующей буферной смеси. Содержимое колбы прогревают в
термостате или водяной бане до 40
о
С, после чего вносят 5 см
3
фермента,
предварительно термостатированного при той же температуре.
Продолжительность гидролиза 30 минут. Реакцию прекращают добавлением 10
см
3
6%-ного раствора сернокислой меди, после этого колбу охлаждают, и объем
смеси доводят водой до метки. Образовавшуюся под действием амилаз
мальтозу определяют методом Бертрана.
Полученные результаты сводят в таблицу и строят график,
характеризующий влияние реакции среды на активность ферментов.
Опыт 4. Влияние рН на декстринирующую способность солодовых
амилаз
Для выяснения влияния рН на декстринирующую способность амилаз
берут 10 пробирок и наливают в каждую по 2,5 см
3
буферных растворов,
состоящих из следующих количеств 0,2 М раствора Na
2
HPO
4
и 0,1 М лимонной
кислоты.
Количество, см
3
пробирки
0,2 М р-ра
Na
2
HPO
4
0,1М р-ра
лимонной
кислоты
рН
буферной
смеси
1 0,27 2,23 2,6
2 1,10 1,40 4,4
3 1,29 1,21 5,0
4 1,39 1,11 5,4
5 1,51 0,99 5,8
6 1,65 0,85 6,2
7 1,82 0,68 6,6
8 2,06 0,44 7,0
9 2,27 0,23 7,4
10 2,43 0,07 8,0
Затем в каждую пробирку приливают по 5 см
3
2 %-ного раствора
крахмала и по 2,5 см
3
экстракта солода (экстракт следует приливать, начиная с
1-ой пробирки, через равные промежутки времени – 30 сек). Содержимое
пробирок после приливания экстракта тщательно перемешивают и оставляют
на 10 минут. По прошествии этого времени берут через каждую минуту пробу
(2-3 капли) из седьмой пробирки и добавляют две капли йода. Спустя 2 минуты
после того, когда содержимое этой пробирки будет давать красно-бурое
окрашивание, во все пробирки добавляют по несколько капель йода и
13
      В мерную колбу на 100 см3 вносят 50 см3 2 %-ного раствора крахмала и
5 см3 соответствующей буферной смеси. Содержимое колбы прогревают в
термостате или водяной бане до 40оС, после чего вносят 5 см3 фермента,
предварительно    термостатированного     при     той    же    температуре.
Продолжительность гидролиза 30 минут. Реакцию прекращают добавлением 10
см3 6%-ного раствора сернокислой меди, после этого колбу охлаждают, и объем
смеси доводят водой до метки. Образовавшуюся под действием амилаз
мальтозу определяют методом Бертрана.
      Полученные результаты сводят в таблицу и строят график,
характеризующий влияние реакции среды на активность ферментов.

           Опыт 4. Влияние рН на декстринирующую способность солодовых
                                    амилаз

      Для выяснения влияния рН на декстринирующую способность амилаз
берут 10 пробирок и наливают в каждую по 2,5 см3 буферных растворов,
состоящих из следующих количеств 0,2 М раствора Na2HPO4 и 0,1 М лимонной
кислоты.


      № пробирки     Количество, см3         рН
                     0,2 М р-ра 0,1М р-ра    буферной
                     Na2 HPO4     лимонной   смеси
                                  кислоты
      1              0,27         2,23       2,6
      2              1,10         1,40       4,4
      3              1,29         1,21       5,0
      4              1,39         1,11       5,4
      5              1,51         0,99       5,8
      6              1,65         0,85       6,2
      7              1,82         0,68       6,6
      8              2,06         0,44       7,0
      9              2,27         0,23       7,4
      10             2,43         0,07       8,0

      Затем в каждую пробирку приливают по 5 см3 2 %-ного раствора
крахмала и по 2,5 см3 экстракта солода (экстракт следует приливать, начиная с
1-ой пробирки, через равные промежутки времени – 30 сек). Содержимое
пробирок после приливания экстракта тщательно перемешивают и оставляют
на 10 минут. По прошествии этого времени берут через каждую минуту пробу
(2-3 капли) из седьмой пробирки и добавляют две капли йода. Спустя 2 минуты
после того, когда содержимое этой пробирки будет давать красно-бурое
окрашивание, во все пробирки добавляют по несколько капель йода и


                                                                          13