Методы исследования мяса и мясных продуктов. Забалуева Ю.Ю - 21 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

41
к – коэффициент пересчета азота на белок: 6,25-
при превалировании в рационе животного
белка, 6,0 - при превалировании растительного
белка;
Д – масса, взятая для анализа, г (навеска 0,1 г –
мясо и колбасные изделия, 0,05 г – яичный
порошок и кормовая мука).
Методы определения белков без предварительной
минерализацией проб
При определении массовой доли белков в образцах
мышечной ткани методом Лоури, биуретовым методом или
методом, основанном на связывании красителей белками,
осуществляют подготовку проб.
Подготовка проб: предварительно исследуемый
образец тщательно измельчают сначала ножом на часовом
стекле или на мясорубке, а затем на гомогенизаторе.
После этого для приготовления щелочного экстракта
15г гомогенизированного образца взвешивают в колбе
вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл дистиллированной
воды и 10 мл раствора гидроксида натрия молярной
концентрацией 1 моль/л. С помощью воды суспензию
переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят до
метки дистиллированной водой и хранят 12 ч в холодильнике.
После этого 75 мл экстракта (из верхней части колбы)
фильтруют через смоченный дистиллированной водой
бумажный фильтр диаметром 15 см, удаляя первые 15 мл
фильтрата.
42
¾ Метод определения массовой доли белка по
Лоури (экспресс-метод)
Метод Лоури основан на реакции взаимодействия
фенольного реактива Фолина—Чокалтеу с щелочными
растворами белков, приводящей к образованию продуктов
реакции синего цвета. Интенсивность окраски зависит от
содержания в исследуемом белке тирозина и триптофана.
Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют при
длине волны 750 нм. Метод рекомендуется для определения
массовой доли белка в сильно разбавленных растворах, при
наблюдении за ходом ферментативных процессов, для
определения белков сыворотки крови, яичного альбумина,
белков молока, фракционированных растительных белков,
белков митохондриальных фракций и мембран.
• Метод Лоури в модификации Дэвини и Гергей
К 0,2 мл исследуемого раствора, содержащего 5-100
мкг белка , прибавляют 1 мл реактива С, смешивают и через
10 мин быстро вносят 0,1 мл реактива Д, встряхивают и
оставляют при температуре 20±5
0
С на 30 мин. А затем
снимают показания на спектрофотометре при λ=750 нм.
Построение калибровочного графика. Содержание
белка в растворе определяют по калибровочному графику,
который строят с использованием раствора тирозина
известной концентрации. Для приготовления стандартного
раствора 20 мг кристаллического тирозина растворяют в 200
мл раствора соляной кислоты молярной концентрации 0,2
моль/л. Калибровочный график строят, используя растворы
тирозина с рекомендуемой массовой концентрацией,
представленные в таблице 2.
По результатам определения строят калибровочный
график, откладывая на оси абсцисс концентрацию
стандартных растворов (мкг/мл) тирозина, а на оси ординат –

Страницы